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​实时荧光定量PCR/qPCR

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​实时荧光定量PCR/qPCR

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  • 提供商: 北京晶典生物科技有限公司
    服务名称: ​实时荧光定量PCR
    实时荧光定量PCR
    简介
    实时荧光定量PCR(qPCR)技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时检测整个PCR 进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据,可用于检测基因组拷贝数变异。
     
    实时荧光定量PCR技术原理
        qPCR分为两种,包括TaqMan荧光探针和SYBR Green荧光染料。
        使用SYBR荧光染料法来进行荧光定量PCR时,首先在PCR反应体系中加入过量SYBR荧光染料。SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后发射一定量的荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
    Taqman探针则是利用探针与模板的特异性结合的特点,以及探针内荧光报告基团和淬灭基团的分子特性来实现对PCR进行定量检测。这种方法可以实现高灵敏度,严格针对特定碱基序列的定量实验。
     
    实时荧光定量PCR技术特点
    (1)封闭反应,无需PCR后处理;
    (2)特异性强,灵敏度高;
    (3)采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确;
    (4)定量范围宽,可达到10个数量级;
    (5)仪器在线式实时检测,结果直观,避免人为判断;
    (6)可实现一管双检或多检;
    (7)操作安全,缩短时间,提高效率。
     
    实时荧光定量PCR服务内容
    北京晶典生物科技有限公司竭诚为您提供完整的自定义基因组区域拷贝数变异(CNV)实时荧光定量PCR检测服务。
     
    实时荧光定量PCR样本要求
    (1)提供新鲜组织/细胞材料或者直接提供已纯化的DNA,确保总量>5μg/样品;
    (2)提供已知的全场基因序列或者待检测CNV的基因组区域;
    (3)客户可提供引物,没有引物的情况下,本公司可帮助设计合成。
     
    实时荧光定量PCR结果提交
    (1)实验详细步骤和相关数据;
    (2)标准曲线、扩增曲线或者溶解曲线等;
    (3)完整的实验报告;
    (4)生物信息分析报告(如客户需要)

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