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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)
- 库存:
662
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")末端脱氧核苷转移酶厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:末端脱氧核苷转移酶厂家价格
英文名:Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)
规格:500U
品牌:百奥莱博
编号:BTN120312
产品简介:
末端脱氧核柑转移酶 TdT是一种模板非依赖型DNA聚合酶,催化在寡核苷酸、单链和双链DNA的3’-OH重复添加脱氧核糖核苷酸。TdT反应需要含有至少3个碱基的短序列作为引物。以RNA为模板时,TdT性能严格依赖于受体RNA 3’-末端的三级结构和核柑酸的种类。总的来说,TdT对RNA模板的作用效率比DNA模板低。
此产品特点是:
1.通过Okayama-Berg 法给载体或cDNA加上互补同聚尾。
2.线性双链DNA的各类3’-OH末端同聚物加尾。
3.寡聚脱氧核苷酸和DNA标记
4.5’-RACE(快速扩增cDNA末端)
5.凋亡反应的原位定位。
质量标准:
无endodeoxyribonucleases,exodeoxyribonucleases,phosphatases and ribonucleases污染。SDS-PAGE下呈单一带,纯度>99%。
活性单位定义:
1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmo脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。酶活性分析混合物:200mM二甲胂酸*(pH7.2),1mM CoCl2,0.01%(v/v)Triton×-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP和0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
Buffer成分:
储存Buffer:100mM醋酸*(pH6.8),2mM 2-cay巯基乙醇,0.01%(v/v)Triton ×-100和50%(v/v)afi甘油。反应Buffer,5×:1M二甲胂酸*,125mM Tris,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2(pH7.2,25℃)。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
欲咨询购买末端脱氧核苷转移酶厂家价格,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·单细胞全基因组扩增试剂盒
编号:BTN100938
英文名称:Single Cell WGA Kit
规格:30次
产品简介:
本产品是用于从单细胞(或数个细胞)中制备和扩增全基因组的试剂盒。它是整合单细胞裂解液和全基因组扩增试剂盒而成。本产品有如下优点:
1.即开即用,不需要单独准备所需试剂。
2.可以扩增单个细胞的基因组达上万倍。
3.具有全基因组扩增的所有特点,包括高产量和高保真性。
4.可使用各种来源的样品,包括全血、干血、发根、口腔粘膜刮液、培养细胞、真菌、病毒等。
5.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片端PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异、SNP、STR)等。
使用及效果:
在含单个细胞(或数个细胞)的溶液中(总体积5 μL,不足5 μL的用水补足)加入5 μL的裂解液A,65℃ 10分钟。再加入5 μL的溶液B(约1 ng-50 ng)和10μL的WGA mix和0.5 μL phi29 DNA聚合酶,混匀后30℃温育16小时后即可。
运输及保存:
低温运输、-20℃保存、有效期一年。
末端脱氧核苷转移酶厂家价格关键词:末端脱氧核苷转移酶,Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT),BTN120312
·EGTA溶液
编号:BTN130532
英文名称:EGTA Solution
规格:10mL
产品简介:
本产品为无色液体,浓度为0.5mg/mL。EGAT(乙二醇二乙*二胺四乙酸),分子量是380.35,难溶于水,溶于1M NaOH。工作浓度为0.5~1.3mM(0.2~0.5mg/mL)。EDTA是一种常用的螯合剂,可以特异抑制Ca2+依赖的蛋白酶活性。
运输及保存:
低温运输,4℃保存,有效期一年。
·一站式植物mRNAOUT
编号:BTN81028
英文名称:One-Stop Plant mRNA Isolation Kit
规格:25次
产品简介:
构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR方法检测稀有的mRNA等研究常常需要从总RNA中分离mRNA,mRNA只占总RNA的1%左右,但由于带poly(A)尾巴,所以可以通过与Oligo(dT)纤维素的亲和结合而与其他RNA(如rRNA、tRNA等)分离开。本产品专门用于从植物组织中一站式提取mRNA。
它具有下列特点:
1.一站式,是由我公司的高效、无多糖柱式植物RNA提取试剂和mRNA提取试剂两个产品整合而成,即开即用,非常方便。
2.一次可以处理50-500 mg的植物组织,能得到约10-15 μ g总RNA,从中可得0.1-0.5μg左右的mRNA。
3.Oligo(dT)纤维素吸附能力强,每克可以吸附50-80 OD的mRNA,相当于2000-3000μg mRNA。
4.mRNA提取过程操作简单,只需要离心就可以完成,免去了常规的灌柱、洗柱等繁琐操作。
5.得到的mRNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
使用及效果:
1.用植物RNAOUT的方法提取植物总RNA,最后用50 μ L洗脱,将两管收集在一起,共得到100 μ L总RNA(详见柱式植物RNAOUT的使用手册)。
2.从总RNA中纯化mRNA:将0.5 mL 溶液A(结合液)加入到一管装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100 μ L加热到65℃ 5分钟后加入等体积的溶液A,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离
心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5 mL溶液A,混匀后4℃ 200 g 离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次。用RNase-free水洗脱mRNA。
3.用微量核酸沉淀剂沉淀mRNA(详见微量核酸沉淀剂使用手册)。
注:所得mRNA只占总RNA的5%左右,很微量很珍贵,一般不宜电泳检测。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,Oligo(dT)纤维素低温运输,-20℃保存,有效期一年。
末端脱氧核苷转移酶厂家价格关键词:末端脱氧核苷转移酶,Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT),BTN120312
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文献和实验(一)原理 凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后,将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点(缺口),暴露出大量3- 羟基末端,如用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT )将标记的dUTP 进行缺口末端标记,则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。 (二)荧光标记法 1 .材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell
原位末端转移酶标记技术 (ISEL)检测细胞凋亡 根据细胞凋亡时核酸内切酶被激活,将细胞核染色体DNA从核小体连接处切断,产生单股或双股DNA链。根据这一生化特性,将外源性核苷酸和酶(末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)和DNA聚合酶I或Klenow大片段)渗入到凋亡细胞中,催化标记的外源性核苷酸与断裂的 DNA链相结合,并通过一定的显示系统显色。 由于凋亡细胞内的内源性核酸酶被激活后,将自身染色体或DNA切割,产生与DNA断裂数目相同
置于湿盒中);同时设立对照: A)阴性对照:每一实验均应设立对照,每孔加50μl标记液(无末端转移酶)代替TUNEL反应混合物; B)阳性对照:每一实验均应设立对照,用微球核酸酶或DNA酶I处理已固定/透化的细胞(1μg~1mg/ml,室温10min),以诱导DNA链断裂。37℃孵育 30min; PBS洗3次; 单个转换和分析:标本吹干,加50μl转换POD(注意要在单层细胞上均匀分布POD,为避免蒸发,将玻片置于湿盒中)37℃ 30min,PBS洗3次,加50~100μl
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