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- 翌圣生物（Yeasen）
- 14453ES03
- 上海翌圣
- 2025年10月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
- 保质期：
2年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
1ml
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | ||
| 14453ES03 | 14453ES08 | 14453ES50 | ||
| 14453 | Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (100 U/µL) |
1 mL | 5 mL | 50 mL |
单位定义37 °C，60 min内将1 nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
产品应用合成同聚物和杂聚物；线性双链DNA的3’-OH末端同聚物加尾；寡聚脱氧核苷酸和DNA标记；5’-RACE（快速扩增 cDNA末端）；凋亡反应的原位定位。
抑制与失活抑制剂：金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子。
失活：加入EDTA或70 °C加热10 min。
运输和保存方法干冰运输。-20 °C 保存，有效期2年。
注意事项1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2. 本产品仅作科研用途!HB221130
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文献和实验原位末端转移酶标记技术 （ISEL）检测细胞凋亡 根据细胞凋亡时核酸内切酶被激活，将细胞核染色体DNA从核小体连接处切断，产生单股或双股DNA链。根据这一生化特性，将外源性核苷酸和酶（末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）和DNA聚合酶I或Klenow大片段）渗入到凋亡细胞中，催化标记的外源性核苷酸与断裂的 DNA链相结合，并通过一定的显示系统显色。 由于凋亡细胞内的内源性核酸酶被激活后，将自身染色体或DNA切割，产生与DNA断裂数目相同
（一）原理 凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后，将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点（缺口），暴露出大量3- 羟基末端，如用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT ）将标记的dUTP 进行缺口末端标记，则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。 （二）荧光标记法 1 ．材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell
置于湿盒中）；同时设立对照： A）阴性对照：每一实验均应设立对照，每孔加50μl标记液（无末端转移酶）代替TUNEL反应混合物； B）阳性对照：每一实验均应设立对照，用微球核酸酶或DNA酶I处理已固定/透化的细胞（1μg～1mg/ml，室温10min），以诱导DNA链断裂。37℃孵育 30min； PBS洗3次； 单个转换和分析：标本吹干，加50μl转换POD（注意要在单层细胞上均匀分布POD，为避免蒸发，将玻片置于湿盒中）37℃ 30min，PBS洗3次，加50～100μl
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