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文献和实验文献速递|Cytospin涂片免疫染色在肿瘤生殖学领域的应用(二)
杂交分析、RT-PCR和Cytospin免疫染色;体内组织再生实验是将新鲜分离前列腺细胞皮下注射SCID-NODIL2γrNULL 小鼠6-24周后,取样处理包埋切片进行免疫组化染色分析;收集332名根治性前列腺癌手术标本制作成TMA进行免疫组化染色,评估KRT13的阳性表达比例及临床结果(疾病转移、生存率和复发等)之间的关系。 结果 Result Affymetrix基因表达数据显示,KRT13在FC和TIC中
转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具 (Burnett,1981)。 药品试剂: 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适用范围的参考,均以明胶-NET 稀释的。 a. 传统抗血清: 1:100 到1:1,000 b. IgG (冷冻干燥品): 10~50 μg/mL c. 单株抗体
试剂和材料:1. 一抗:(1) ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2) 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3) 细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5----------- 1:500(4) 细胞角蛋白12(K12)---兔多克隆J7-------------- 1:2002. 二抗;(1) 抗小鼠IgG-------------Alexa-488----
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