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- 2025年11月25日
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40% 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶液
Bio-Rad 提供用于管式凝胶IEF 2-D 电泳系统的多种丙烯酰胺选择。
聚丙烯酰胺是一种常用的电泳基质，由丙烯酰胺与共单体交联剂（如甲叉双丙烯酰胺，bis）的自由基聚合而 成。可靠的电泳结果取决于这一反应的可重复性，高纯度的起始试剂是影响凝胶质量的一个重要因素。Bio-Rad 99.9% 超纯丙烯酰胺经过严格的纯化和测试，具有均衡聚合所需的一切品质。丙烯酰胺有3 种形式，可满足每个 实验室的需要：
- 丙烯酰胺粉剂― 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺粉剂，浓度和丙烯酰胺/ bis 比率可调
- 预混合丙烯酰胺/ 甲叉双丙烯酰胺粉剂― 含量固定的Bio-Rad 99.9% 超纯丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺。直接加入 一定量的超纯水即可配制成30-50% 的储存液。
- 丙烯酰胺溶液― 可直接使用，有2 种浓度（30% 和40%），3 种丙烯酰胺/ bis 比（19 :1，29 :1 和37.5 :1）
| 比率 | %C | 常规应用 |
| 19:1 | 5 | DNA 测序 |
| 29:1 | 3.3 | 蛋白分离 |
| 37.5:1 | 2.6 | 蛋白分离 |
确定孔径:%T and %C
丙烯酰胺凝胶孔径大小由2个参数决定。总的单体浓度（%T）定义为：
通过调节这两个参数，可优化孔径大小以获得目标分子最佳分离效果和分辨率。如果你在确定最佳的%T 和%C 方 面需要帮助，请与Bio-Rad 技术支持联系。
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文献和实验化物酶同工酶的红褐色酶谱。该酶活性染色过程如下：过氧化物酶分解H2O2 产生氧基，后者使联大茴香胺发生反应生成褐色化合物。所以用染色液浸泡凝胶时，有过氧化物酶同工酶蛋白质条带的部位便出现褐色的谱带。倒掉染色液，重新加入7%的乙酸溶液，于日光灯下观察记录酶谱，绘图或照相。 五、附注 1．如果室温较高，可适当减少电流，延长电泳时间，或采取降温措施，以免温度过高造成酶活损失。 2．工业纯丙烯酰胺（Acr）和甲叉双丙烯酰胺（Bis）的纯化方法 （1）Acr的纯化 称取70g的Acr，于50℃溶于
瓶子)。 ( 3 ) 分离胶缓冲液（pH 8.8)：称取 12.11 g Tris- HCl 配成 1 mol/L 的终浓度溶液，称取 0.27 g SDS 配成 0.27% 的终浓度溶液。溶于 80 ml MQ 水中，调至 pH 8.8，最后定容至 100 ml。 ( 4 ) 浓缩胶用的丙烯酰胺（丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺=29.2：0.8)：29.2 g 丙烯酰胺，0.8 g BIS。用 MQ 水定容至 100 ml，黑暗中保存（可使用棕色瓶子）。 ( 5 ) 浓缩胶缓冲液（pH 6.8)：称取 3.03
主要试剂 1、 丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。)储于棕色瓶，4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。 2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液:10%(w/v)0.1gSDS
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