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Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
WE0328型Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒厂家现货由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒等细胞凋亡与增殖产品请联系我司咨询订购。
名称:WE0328型Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒厂家现货
品牌:百奥莱博
编号:WE0328
产地:国产|进口
英文名:Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用Annexin-PE与7-AAD双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。7-AAD是一种核酸染料,可进入死细胞内与DNA结合,能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色。7-ADD与PI有着相似的荧光特性,但其发射波谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,因此通常将Annexin V-PE与ADD配合染色,以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
4×Binding Buffer | 10ml |
7-AAD Viability Staining Solution | 500μl |
Annexin V-PE | 250μl |
组份 | 25次 | 100次 |
Mammalian Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
细胞培养板类型或平皿类型 | 抽提试剂使用量 |
100mm | 500-1000μl |
60mm | 250-500μl |
6孔培养板 | 200-400μl/孔 |
24孔培养板 | 100-200μl/孔 |
96孔培养板 | 50-100μl/孔 |
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
低提取率 | 低蛋白表达量 | 优化转染系统 |
试剂使用量不够 | 增加抽提试剂使用量 | |
试剂无法溶解细胞膜 | 增加裂解时间或者加大晃动幅度 | |
无法获得膜蛋白 | 更适合提取核浆蛋白 | 使用真核细胞膜蛋白抽提试剂盒 |
组份 | 20次 |
pUC-T Simple(50 n g/μl) | 20μl |
Control Insert(50ng/μl) | 10μl |
Quick T4 DNA Ligase | 20μl |
2×Quick Ligation Reaction Buffer | 120μl |
成分 | 反应体系 | 对照体系 |
pUC-T Simple(50ng/μl) | 1μl | 1μl |
DNA 插入片段 * | 0.1 -0.3 pmol | -- |
Control Insert DNA | -- | 1μl |
2×Quick Ligation Reaction Buffer | 5μl | 5μl |
Quick T4 DNA Ligase | 1μl | 1μl |
RNase-Free Water | 补足至10μl | 补足至10μl |
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