尿嘧啶-DNA糖基化酶-Uracil DNA Glycosy

产品及特点：

E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)催化尿嘧啶从含尿嘧啶的 DNA 上释放。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶，但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。其反应原理图如下：

应用

在 37 ℃ 条件下，1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后，此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95 ℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95 ℃ 热处理后该酶仍有部分活性，建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解，也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。

尿嘧啶-DNA糖基化酶-Uracil DNA Glycosylase（UDG）反应条件

1X UDG 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl，1mM EDTA，1 mM DTT (pH

8.0)]。37℃ 温育。

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃条件下，30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA (104-105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。

Buffer 成分

10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，0.1 mg/mlBSA，50% Glycerol，pH 7.4 @ 25℃

尿嘧啶-DNA糖基化酶-Uracil DNA Glycosylase（UDG）备注

UDG 在较广的 pH 范围内均有活性，最适 pH 是 8.0，不需要二价阳离子。活性受高离子强度 (>200 mM) 所抑制。超纯 dNTP Mixture(10 mM each)    5×1ml
dATP 100mMsolution    0.25 ml
dCTP 100mM solution    0.25 ml
dGTP 100mM solution    0.25 ml
dTTP 100mM solution    0.25 ml
PCR enhancer    100μl
PCR enhancer    500μl
TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase （反转录酶）    5000U
    10000U
    10000U X 5
"TUREscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit                       （第一链反转录试剂盒）
"    25次
    50次
" TUREscript One Step RT-PCR Kit                                           （一步法反转录试剂盒）
"    25次
    50次
" TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit                             （两步法荧光定量反转录试剂盒）
"    25次
    50次
DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600）    50T
DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600）    500T
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200）    50T
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200）    500T
DNA Marker Ⅲ（条带300.500.800.1500.2000.3000.5000）    50T
DNA Marker Ⅲ（条带300.500.800.1500.2000.3000.5000）    500T
DNA Marker Ⅳ（条带500.1000.1500.3000.5000.8000）    50T
DNA Marker Ⅳ（条带500.1000.1500.3000.5000.8000）    500T
DNA Marker Ⅴ（条带200.400.700.1000.1500.2000）    50T
DNA Marker Ⅴ（条带200.400.700.1000.1500.2000）    500T
DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000)    50T
DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000)    500T
DNA Marker Ⅶ（条带300.500.1000.1500.2000.2500）    50T
DNA Marker Ⅶ（条带300.500.1000.1500.2000.2500）    500T
50bp DNA Marker（条带50.100.150.200.250.300.250.400）    50T