尿嘧啶-DNA糖基化酶

PCR需要注意的一些问题

的DNA也会是污染源。 可以在PCR过程中使用良好的实验步骤减少残余污染。使用抗气雾剂移液管的阻止气雾剂进入eppendorf管内。为PCR样品配制和扩增后分析设计隔离的区域，在准备新反应前更换手套。总是使用不含有模板的阴性对照检测污染。使用预先混合的反应成分，而不是每个反应的每个试剂单独加入。 一种防止残余污染的方法是使用尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）。这种酶（也称为尿嘧啶-N-糖基化酶或UNG）移除

荧光定量 PCR——想要实验结果可靠，各种对照不可少

」和「扩增区」分割开 PCR 体系配置和 PCR 扩增实验。如果不具备这样的条件，首先要避免荧光定量 PCR 实验结束之后开盖，以防扩增产物形成气溶胶对后续实验造成污染。少量意外开盖不能避免时，可以使用含有 UNG 酶（uracil-N-glycoslyase, 尿嘧啶 DNA 糖基化酶）的扩增预混液。如果在 PCR 反应中以 dUTP 代替 dTTP 参入到 PCR 产物中，形成了含有 dUTP 的扩增产物，UNG 酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 碱基的糖苷键， 降解 PCR 扩增

Cancer Cell：詹启敏院士团队合作研究揭示肠道微生物影响直肠癌新辅助治疗疗效的原因

生物合成，能降低肿瘤细胞的生存，而外源性核苷的补充能够抵消化疗药物对嘧啶或嘌呤从头生物合成的抑制，使得降低肿瘤细胞 DNA 双链损伤从而存活。进一步利用核苷转运蛋白的抑制剂阻断外源性核苷摄取能够减弱核苷混合物对 5-氟尿嘧啶或电离辐射的保护作用，抑制电离辐射后 DNA 双链损伤的修复，证实了外源性核苷补充能够帮助肿瘤细胞从肿瘤治疗的打击中存活下来。 图片来源：Cancer Cell 4. 体内实验揭示 B. vulgatus 介导的核苷酸生物合成有助原位结直肠肿瘤抵抗治疗 体内动物实验证明核苷的补充