NEB特约代理商|M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（U

【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答

核苷酸激酶缓冲液中进行。 质量保证： 无核酸内、外切酶污染。每批T4 DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测，该实验可以检测出待连接DNA末端的任何破坏。结果表明>99.9%的DNA末端未受任何降解。 单位定义(粘性末端活性单位）：在20µl连接反应体系、0.12µM (300µg/ml)的5'-末端浓度条件下，16°C反应30分钟，能使50% 的经Hind Ⅲ消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个NEB单位。 一个粘端连接活性单位=0.015个韦氏（ATP-PP交换）单位

DNA fingerprinting

Resuspend BAC DNA in 50 µl TE pH8.0 or 50 µl ddH2 O Miniprep with Qiagen kit   Check the quality and quantity of miniprep BAC DNA Digest 5 µl BAC DNA with Hind III Run

DNA fingerprinting

digestion Make mixture: 2.0 µl New England BioLab buffer 2 0.5 µl Ban I (NEB, Cat# 118) 0.5 µl Msp I (NEB, Cat# 116) 0.25 µl RNase A 6.75 µl ddH2 O (for AutoGen miniprep) or 13.75 µl ddH2 O (for Qiagen miniprep) 10 µl BAC DNA (AutoGen miniprep) or 3 µl BAC