- ¥1690
- Ybscience
- 中国/上海
- YB130595-100
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存和运输， -20℃或-80℃避 光保存
- 保质期：
6个月。
- 英文名：
Dual Luciferase Assay Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
100次/盒
产品及特点：
由于检测光量子的方法非常敏感，采用生物发光（bioluminescent）法 ，是报告基因检测最常用的有效手段。荧光素酶（luciferase）催化底物荧光素（luciferin）的转化，发射出光子。萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）和海肾荧光素酶（Ranilla luciferase）催化的发光反应，具有相似的光学特征和很好的浓度线性范围（7~8个数量级的线性范围），酶的检测灵敏度达10-18~10-20 mol，但两者催化的化学反应底物和最适反应条件完全不同。利用这一特性，将这两种荧光素酶配合，即可形成十分有效的双荧光素酶报告基因系统，其中Ranilla luciferase通常作为内参照。其原理如下：
双荧光素酶活性检测试剂盒-Dual Luciferase Assay Kit本试剂盒提供了一体化形式的双荧光素酶检测系统。采用通用裂解缓冲液，适合于两种荧光素酶活性的保持，且与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。优化的两种酶反应体系，使每种发光反应持续数十分钟，以便于手工操作多个样品，并保证Firefly luciferase发光及时淬灭，不影响后续Ranilla luciferase的测定。优的反应体系还使两种荧光素酶活性比值趋于合理的敏感范围，更有利于后续数据的比较。该产品特点如下：
1. 准确性高：使用海肾荧光素酶作为内参照，减少了细胞数目、细胞健康状态、转染效率和非特异性细胞反应等因素的影响，使主报告基因的结果归一化
2. 高度灵敏：对两种荧光素酶的检测灵敏度达10-18~10-20 mol
3. 线性范围宽：线性范围达到7~8个数量级
4. 快速简便：一体化两步法检测，特别适合于高通量筛选
双荧光素酶活性检测试剂盒-Dual Luciferase Assay Kit使用及效果
收取转染细胞，1x通用裂解液裂解。按一定比例混合，配制两种发光检测液。同一个样品中先后加入两种发光检测液，测定两种酶催化的发光单位RLU。（不同容器细胞所需1xULB的体积和配制发光检测液比例详见产品使用手册）71203-50 柱式植物RNAout 50次 790
90404-50 柱式植物RNAout2.0 50次 1250
80903-5 大提柱式植物RNAout 5次 990
60305-50 真菌RNAout 50次 690
60305-250 真菌RNAout 250次 2990
80804-50 柱式真菌RNAout 50次 890
80904-5 大提柱式真菌RNAout 5次 990
51102-100 细菌RNAout 100次 390
51102-250 细菌RNAout 200次 790
80103-50 柱式细菌RNAout 50次 590
80905-5 大提柱式细菌RNAout 5次 990
90704-50 土壤RNAout 50次 1590
90705-50 柱式土壤RNAout 50次 1990
3073-50 一管式病毒RNAout 50次 690
3073-200 一管式病毒RNAout 200次 1990
71001-50 柱式病毒RNAout 50次 990
80922-1 96孔板病毒RNAout 1次 1290
80922-5 96孔板病毒RNAout 5次 4990
81220-50 柱式昆虫RNAout 50次 990
miRNA提取
90203-50 沉淀法miRNA分离试剂盒 50次 990
70501-30 一站式沉淀法miRNAout 50次 990
70501-100 一站式沉淀法miRNAout 100次 1990
80104-50 一站式柱式miRNAout 50次 1590
80906-5 一站式大提柱式miRNAout 5次 2400
mRNA提取
80908-25 一站式动物mRNA提取试剂盒 25次 990
81108-25 一站式全血mRNA提取试剂盒 25次 1190
81028-25 一站式植物mRNA提取试剂盒 25次 1290
81103-25 一站式真菌mRNA提取试剂盒 25次 1190
80817-25 mRNA提取试剂盒 25次 590
90301-25 Oligo（dT）纤维素 25mg 190
RNase清除及抑制
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文献和实验、RNA剪接研究。 萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响，而双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线，从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。Dual-Luciferase®双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶，两者没有种源同源性并对应不同的反应底物，故而没有交叉干扰。得益于超强的光
The Split Luciferase Complementation Assay
A split luciferase complementation assay to study protein–protein interactions within Arabidopsis protoplasts in 96-well plates is described in this protocol. Two proteins of interest, a bait and prey, which are genetically fused to amino
superskyfly 我自己都觉得我自己很牛，千百人都做出来的试验，我就是做不出来。质粒用的是Promega p4.32-NF-kB-Luc, 转染用的是Invitrogen的Lipofactamin, 激活用的是Sigma生产的PMA和PHA-P,Assay用的是Promega dual,结果加了PMA和PHA的和不加的读数几乎没有区别。加了compound的和不加的也没有区别。 用过PC3, Jurkat, A549，HCT116都是一样。
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