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细胞凋亡检测
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OBiO和元生物
细胞功能学实验
1、技术简介:
细胞凋亡检测是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自动结束生命的过程。它是一个主动的、高度有序的、基因控制的、一系列酶参与的过程。
细胞凋亡过程中磷脂酰丝氨酸外翻示意图
磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧,在细胞凋亡早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin V能与PS 高亲和力特异性结合。将Annexin V 进行荧光素(FITC、PE)或Biotin 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此用Annexin V 和PI将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。
2、技术及服务特点:
1)数据真实可靠,可重复性高;
2)实验周期快;
3)提供真实可靠的数据分析及实验报告结果。
3、服务流程:
1)客户提供:目的细胞及信息、目的基因及信息、其他特殊要求;
2)实验过程:转染细胞、收集细胞、Annexin-V-FITC/PC双染进行染色、上机检测;
3)交付内容:提供细胞迁移/细胞侵袭实验报告。
4、实验案例图:
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| 对照组 | 空载组 | 干扰组 |
5、其他相关技术:
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文献和实验References [1] Danise P, Amendola G, Di CR, et al. Nucleated red blood cells and soluble transferrin receptor in thalassemia syndromes: relationship with global and ineffective erythropoiesis. Clin Chem Lab Med. 2009. 47(12): 1539-42. STABLE
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在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的变化,而此阶段Propidium Iodide(PI)不能通过细胞膜。细胞坏死时,虽然也会发生磷脂酰丝氨酸外翻,但此时细胞膜的通透性明显
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