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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Proteinase K
- 库存:
703
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")蛋白酶K北京厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:蛋白酶K北京厂家现货
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100mg
英文名:Proteinase K
蛋白酶K是一种以丝*酸为活性中心的枯草类蛋白酶,具有广泛的底物特异性,特别优先分解与疏水性*基酸、含硫*基酸、芳香族*基酸C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下进行分解蛋白作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性,主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解,溶解后的蛋白酶K 浓度为20mg/ml。
2、孵育温度为25℃~65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
3、配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。-20℃长期保存。
储存条件:室温(15~30℃)
蛋白酶K北京厂家现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·抗MBP标签单克隆抗体
编号:WE0338
英文名称:Anti MBP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:20μl|100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与MBP结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种MBP编码载体表达的MBP-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:全长MBP蛋白
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)
·PCR Mix(含染料)(滴瓶装)
编号:WE0100
英文名称:PCR Mix(With Dye)
规格:5ml
本产品以滴瓶包装,集成了PCR反应所需各要素及稳定剂、增强剂,对PCR反应中各成份的浓度有较高的宽容度,无需加样工具,将本产品直接滴入加有模板、引物的PCR管即可完成反应准备。本产品热稳定性高,启封后置2~8℃保存,六个月内可随时取用。本产品使用高度封闭的热启动DNA聚合酶,可有效减少非特异PCR产物扩增,配制PCR反应体系可在室温进行,但须注意热循环程序的第一步必须包括至少10分钟的95℃热启动。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的大部分PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因;2~8℃存放六个月,活性无明显改变。
使用方法:
本产品以滴瓶包装,使用时,取掉旋盖后将滴瓶倒置,滴塞口对准已加入适量模板和引物的PCR管口上方,以食指和拇指轻轻挤压滴瓶,滴入一滴反应液,即可完成PCR反应准备。正常挤压时,液滴平均体积约为25μl,可能会因挤压滴瓶用力不一,造成挤出液滴体积存在差异,但对多数PCR反应,均可获得良好扩增。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 反应体积 |
| PCR Mix | 1 滴 |
| Forward Primer,10μM | 1μl |
| Reverse Primer,10μM | 1μl |
| Template DNA | ≤4μl |
注意:
1)引物浓度以10μM作为参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)PCR模板的使用量应视DNA性质加以调整。一般而言,在每滴PCR反应中,当模板为质粒DNA时,以1 pg至10ng为宜;当模板为细菌基因组DNA时,以1ng至100ng为宜;当模板为真核生物基因组DNA时,以10ng至300ng为宜。需注意,PCR模板绝非越多越好。过多的模板会对PCR反应产生抑制作用,且容易增高其它抑制物水平,影响扩增效果。
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30-40个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)产品含有高度封闭热启动DNA聚合酶,须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
3)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品的扩增效率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物下游应用设定循环数。如循环次数太少,扩增量不足;如循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,有效期2年
蛋白酶K北京厂家现货关键词:Proteinase K,蛋白酶K,WE0212
·多彩预染蛋白Marker
编号:WE0282
英文名称:Multicolor Protein Marker
规格:20次(100μl)|100次(5×100μl)
本品由10.5-175 kD范围的11条蛋白组成(10.5 kD、14 kD、22 kD、29 kD、42 kD、51 kD、62 kD、70 kD、95 kD、130 kD、175 kD)。由低到高的分子量范围可监测电泳过程中的蛋白分离情况、判断目标蛋白的分子量,并且可以监测Western Blot实验中的转膜效率。10.5 kD、42 kD、95 kD的三条带结合有蓝色染料更便于实时观察电泳进程、判断蛋白分子量。本产品推荐上样量为5μl。
注意事项:
1、本品已包含上样缓冲液,直接使用,不可在100℃加热或煮沸。
2、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。
操作步骤:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、根据加样孔的大小,每泳道加5μl进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。
实验图例
15%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后结果
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
蛋白酶K北京厂家现货关键词:Proteinase K,蛋白酶K,WE0212
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