TRIzon试剂(总RNA提取)品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")TRIzon试剂(总RNA提取)品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：TRIzon试剂(总RNA提取)品牌
编号：WE0191
规格：100ml
品牌：百奥莱博
英文名：TRIzon Reagent
  TRIzon是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便，颜色鲜明，便于分层。本试剂适用范围广泛，可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。样品在TRIzon中被充分裂解的同时能够最大限度地保证RNA的完整性。在加入*仿离心后，溶液会分成三层：上层无色水相、中间层和下层红色有机相，RNA分布在上清层中。收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，可用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等。

自备试剂：*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5M的NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3、本品中含有*酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
4、样品用TRIzon 匀浆后，如不即刻加入*仿，置于-70℃下可放置一个月以上。
5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2～8℃可以保存一周，-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
6、若下游实验对DNA非常敏感，建议用不含RNase的DNase I(货号：WE0213A)对RNA进行处理。

操作步骤：

1．各种材料的处理
1a.植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon中迅速研磨，每30-50 mg组织加入1ml TRIzon，混匀。
注意：样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
1b.动物组织：取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎，每30-50 mg组织加入1ml的TRIzon，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon 1ml混匀。
注意：样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
1c.单层培养细胞：吸去培养液，可直接在培养板中加入适量TRIzon(每10cm2面积需要1ml TRIzon)，用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后，将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中，300×g离心5 min，收集细胞沉淀，仔细吸除所有上清，加入TRIzon 1ml混匀。
注意：
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRNzol加量根据培养板面积决定，不是由细胞数决定。如果TRIzon加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净，否则会导致裂解不完全，造成RNA的产量降低。
1d.细胞悬液：离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon。
注意：
1)加入TRIzon前不要洗涤细胞，以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
1e.血液处理：直接取新鲜的血液，加入3倍体积TRIzon(推荐0.25ml全血加入0.75mlTRIzon)，充分振荡混匀。
1f.可选步骤：对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品，如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎，可以在匀浆处理后4℃，12000rpm(~～13400×g)离心10分钟以除去不溶物质，此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA，而RNA存在于上清中。

2、样品中加入TRIzon后反复吹打几次，使样本充分裂解。室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
3、向以上溶液中加入*仿，每使用1ml TRIzon加入0.2ml*仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置2-3分钟。
4、4℃下12000rpm离心15分钟，此时样品分成三层：红色有机相，中间层和上层无色水相，RNA 主要在水相中，把水相(约600μl)转移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温放置10分钟。
6、4℃ 12000rpm 离心10分钟，弃上清。
7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml TRIzon用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
8、4℃ 12000rpm离心3分钟，小心吸弃上清，注意不要吸弃RNA沉淀。
注意：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
9、室温放置2-3分钟，晾干。加入30-100μl无RNase的水，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。
注意：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。

储存条件：2～8℃避光。

TRIzon试剂(总RNA提取)品牌极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·TMB底物显色试剂盒(可溶型，20×)
编号：WE0309
英文名称：Soluble TMB Kit(20×)
规格：100ml
  TMB(3", 3", 5", 5", -四甲基联*(代"*")*(代"胺"))是辣根过氧化物酶(HRP)显色底物，是目前HRP系统ELISA实验的常用显色试剂。TMB显色底物工作液在HRP的催化下，形成蓝色的阳离子产物，在370 nm和652 nm处有主要吸收峰。加酸终止反应后，蓝色转变为黄色，可以在450 nm波长下测定。本试剂盒使用方便，灵敏度高，效果稳定，颜色产物为可溶性，适用于ELISA，不推荐用于IHC实验。

试剂盒组成：

 

组份	100ml
20×T MB-A	5ml
1×TMB-B	2×50ml

注意事项：
1、显色工作液应即用即配，放置超过10分钟会影响显色效果。
2、TMB颜色底物显色后，随着时间的延长，颜色会逐渐消退，因此显色并终止反应后应尽快读值，否则会影响检测的准确性。
3、以96孔酶标板每孔用量100μl显色工作液计算，5ml 20×TMB Kit 可完成1000孔样品的检测。
4、本产品仅限于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：

1、TMB显色工作液配制：
根据实验需用量，将20×TMB-A和1×TMB-B以1：19的比例均匀混合，即配制成为TMB显色工作液。

2、显色：
1)经HRP标记物孵育并充分洗涤后，酶标板每孔中加100μl TMB显色工作液。
2)室温避光孵育25-30分钟，反应产物呈蓝色。
3)每孔加50μl 0.5M H2SO4 终止显色，此时蓝色产物变为亮黄色。
4)将酶标板置于酶标仪中，450 nm波长下读取数据。

储存条件：2～8℃


TRIzon试剂(总RNA提取)品牌关键词：TRIzon试剂,WE0191,总RNA提取,TRIzon试剂(总RNA提取),TRIzon Reagent


·DAB显色试剂盒(WB IHC)
编号：WE0323
英文名称：DAB Kit(20×)
规格：20ml|100ml
  DAB是HRP的常用底物，在辣根过氧化物酶的催化下，DAB会产生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。该试剂盒适用于HRP系统的的免疫组化中的组织切片、细胞爬片以及Western Blot中PVDF膜、NC膜等的染色。辣根过氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为褐色的化合物，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

试剂盒组成：

组份	20ml	100ml
20×DAB-A	1ml	5ml
1×DAB-B	20ml	100ml

注意事项：
1、工作液现配现用，配制好的工作液2～8℃避光1小时内有效。
2、工作液用量必需充足，保证完全覆盖组织片或印迹膜。
3、显色后的组织切片或细胞爬片可用苏木精或甲基绿复染。
4、对于组织切片，以每张切片用50μl显色工作液计算，1ml 20×DAB为400张切片的用量，3ml为1200张切片的用量。
5、为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件。
6、显色后若背景太深，可以考虑延长封闭时间，避免非特异性染色，或者缩短DAB的显色时间；显色后若显色太弱或没有显色，可以考虑增加一抗或二抗的浓度，或者适当延长显色时间。
7、DAB为可疑致癌物，使用时请采取必要的防护措施。
8、本产品仅用于科研，不能用于人体反应或人体治疗。

操作步骤：
1、DAB显色工作液配制：根据需要量，将20×DAB-A和1×DAB-B以1：19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升DAB-B中滴加1滴(约50μl)DAB-A，混匀即可。
2、显色：
1)印迹膜显色：将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到DAB工作液中)即可显色。显色时间一般为1-5分钟。显色完毕后，将膜浸入水中，终止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色：加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色，显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间，当达到最佳显色效果后，自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封片后可长期保存。

储存条件：2～8℃


TRIzon试剂(总RNA提取)品牌关键词：TRIzon试剂,WE0191,总RNA提取,TRIzon试剂(总RNA提取),TRIzon Reagent


·超纯RNA提取试剂盒
编号：WE0192
英文名称：SuperPure RNA Extraction Kit
规格：50次|200次
  本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒，裂解液充分裂解并匀质化样本，采用独特的硅基质膜吸附技术，通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的RNA，同时最大限度的有效除去蛋白质、无机盐离子及有机杂质等；可从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中快速提取总RNA，每次可处理 30-50 mg组织或5×106细胞，可同时处理多个不同样品。本试剂盒提取得到的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。

试剂盒组成：
 

组份	50次
TRIzon Reagent	60ml
Buffer RW1	40ml
Buffer RW2(浓缩液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free离心管(1.5ml)	50个

保存条件：TRIzon Reagent 2～8℃避光保存，其他组分室温(15～30℃)。

自备试剂：*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。

产品特点：
1、纯度高：最大限度除去蛋白质等杂质，提取的RNA可直接用于下游各种实验。
2、提取量大：独特的裂解液配方，充分裂解细胞或组织，RNA提取量多至100μg。
3、快速：步骤少，操作简单，节省时间。
4、兼容性强：适用于多种动植物组织和细胞RNA的提取。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀，可置于56℃水浴几分钟，即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。
6、若下游实验对DNA非常敏感，建议用不含RNase的DNase I(货号：WE0213S)对RNA进行处理。

操作步骤：
1、样品处理
①植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon Reagent中迅速研磨，每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent，混匀。
注意：样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
②动物组织：取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎，每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意：样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
③单层培养细胞：吸去培养液，可直接在培养板中加入适量TRIzon Reagent(每10cm2 面积需要1ml TRIzon Reagent)，用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后，将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中，300×g离心5 min，收集细胞沉淀，仔细吸除所有上清，加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意：
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRIzon Reagent加量根据培养板面积决定，不是由细胞数决定。如果TRIzon Reagent加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净，否则会导致裂解不完全，造成RNA的产量降低。
④细胞悬液：离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon Reagent。
注意：
1)加入TRIzon Reagent前不要洗涤细胞，以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
⑤血液处理：直接取新鲜的血液，加入3倍体积的TRIzon Reagent(推荐0.25ml全血加入0.75ml TRIzon Reagent)，充分振荡混匀。
⑥可选步骤：对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品，如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎，可以在匀浆处理后4℃，12000rpm(~～13400×g)离心10分钟以除去不溶物质，此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA，而RNA存在于上清中。

2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次，使样本充分裂解。室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心10分钟，此时样品分为三层：红色有机相，中间层和上层无色水相，RNA主要在上层水相中，将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制)，颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心20秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入700μl Buffer RW1，12000rpm离心20秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心20秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、重复步骤8。
10、12000rpm离心2 分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，彻底晾干。
注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中，向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤11。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤11。

储存条件：室温(15～30℃)。

北京百莱博科技有限公司是RNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购TRIzon试剂(总RNA提取)品牌。