北京一站式miRNA柱式提取试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京一站式miRNA柱式提取试剂盒厂家的品牌：百奥莱博，是优质的RNA纯化产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多一站式miRNA柱式提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京一站式miRNA柱式提取试剂盒厂家
产地：国产|进口
英文名：One-stop miRNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

试剂盒特点：
1.一步法直接分离纯化小RNA，比两步法(先分离总RNA和再纯化其中的小RNA)和PAGE电泳回收法更简单。得到的小RNA长度大部分在200nt以下，包括5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 柱式操作，比miRNA提取试剂盒更加简单快捷，整个过程只需要十多分钟。
3.适用范围广，可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。
4.小RNA 纯净，OD260/280一般都在1.9以上。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6. 无基因组DNA的污染。
7.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	100套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
由于离心吸附柱的吸附量限制，本产品每次提取只能处理100mg左右的各种组织，可以在1.5mL塑料离心管中。如果处理样品量大，请分成很多相当于微量提取的量进行，最后再收集在一起。

1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B按1:1的比例混合，然后根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用。注意：溶液A和溶液B混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/mL裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加1mL新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中，然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL裂解物需0.2mL *仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到一根离心吸附柱中以去除大RNA(最好标记以跟后面要用的专门吸附小RNA的另一离心吸附柱区别开来，本试剂盒提供的离心吸附柱之间没任何区别，可以随机选一个做大RNA 吸附，另一个做小RNA 吸附)。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 12000～15000g室温离心半分钟，收集管中的穿透液。大RNA 及DNA将与离心吸附柱的膜结合，小RNA 将存在于穿透液中。但由于离心吸附柱的最大吸附能力为40μg动物RNA，20μg植物RNA，如果样品中的大RNA含量高于上面数值，则穿透液中将同时含有大RNA和小RNA，在此情况下，穿透液需要再次重复上柱以去除大RNA。由于此时离心吸附柱已经吸附了大RNA，所以需要预处理(具体步骤见本手册最后的附录)。
6.在最后得到的不含大RNA的穿透液中加等体积的溶液C，混匀。此时溶液的总体积约1.5mL。
7. 先转移约0.75mL 到一新的离心吸附柱中。注意：不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱。12000～15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
8. 将上步上柱剩余的样品转移到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
9. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 加 0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。此步一般可以省略。
11. 12000～15000g室温离心半分钟以甩出残联液体。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响miRNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入50-100μLRNA 洗脱液。
13. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为miRNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

附录：
1. 将结合有大RNA和DNA的离心吸附柱中加入0.1mL自备的超纯水,12000～15000g室温离心半分钟，弃收集液。
2. 再加 0.1mL自备的超纯水，重复上步一次。
3. 将第5 步的得到、需要进一步去除其中大RNA和DNA污染的穿透液直接上柱，12000～15000g室温离心半分钟，收集穿透液(此穿透液含小RNA)。
4. 如果大 RNA 已经去干净，可以直接进入第6 步；如果大RNA 没有去除干净，则用本附录1-2的方法处理离心吸附柱，然后再将此穿透液加入(接本附录第3 步)。一般样品只需要额外处理一次就可以去除全部的大RNA污染。

关于北京一站式miRNA柱式提取试剂盒厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·ATP溶液(100mM)
编号：BTN120625
英文名称：ATP Solution，100mM
规格：0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于体外RNA转录合成。

ATP分子式为C10H13N5O13P3Na3，分子量是573.1，消光系数为15.4×103 M-1×cm-1(pH7.0)，λmax为259nm。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·辛甲基硫吡喃葡萄糖苷(OTG)
编号：BTN131045
英文名称：1-s-octyl-β-D-thioglucopyranoside
规格：5g
OTG全名是1-s- 辛基-β-D-硫吡喃葡萄糖苷)，它是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。已发现在一些生物系统中，该产品不受β 半乳糖苷酶的影响。光学上透明并且可透析。与辛甲基β 葡糖苷的溶解能力相同，但稳定性更好。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·液体样品蛋白纯化回收试剂盒
编号：BTN121208
英文名称：Liquid Sample Protein Purification Kit
规格：50次
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。

产品特点：
1.适用于各种液体样品，包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏，对一般蛋白样品，最低浓度可达1μg/mL；对含SDS的样品，最低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%，远高于经典的丙*(代"酮")或三*醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
7.产品稳定，可室温长期放置。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	0.5ml
溶液B	1ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

使用方法一(用于不含SDS的液体样品，但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1．将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入10μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置15分钟。
4．加入10μL溶液B，轻轻混匀。
5．冰上放置60分钟。
6．4℃12000～15000×g离心10分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃12000～15000×g离心15分钟。
9．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
11．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品，但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1．将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入8μl溶液B，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4．4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
5．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
9．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。


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·SDS-PAGE分离胶配胶液
编号：BTN100868
英文名称：SDS-PAGE Resolving Gel Buffer
规格：250mL
本产品专门用于配制非联续SDS-PAGE胶的分离胶，其浓度为4×，配胶时即开即用，非常方便。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

·碱性胶电泳液
编号：BTN100816
英文名称：10×Alkaline Gel Buffer
规格：250mL
本品为10×的琼脂糖碱性电泳液，专门用于琼脂糖碱性变性电泳，后者主要用于分析抗核酸酶S1的DNA-RNA杂交分子DNA的大小、分析cDNA链大小、检测反转录酶合成第一条和第二条cDNA链的大小、检测分子克隆中酶的缺口活性、标定DNA缺口平移核素标记实验中试剂的用量等。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·蛋白marker(43～200kD)
编号：BTN70102C
英文名称：Protein Marker(43-200kD)
规格：10次
本产品为蛋白质电泳标准系列，为已知的标准蛋白质混合物，在SDS-PAGE时可以作为分子量标准，估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．简单，不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2．本产品有粉末型和溶液型两种，十分稳定。
3．本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。

所含成分及其分子量		A型	B型	C型
肌球蛋白重链	200.0KD			有
*调素结合蛋白	130.0KD			有
兔磷酸化酶B	97.4KD		有	有
牛血清白蛋白	66.2KD		有	有
兔肌动蛋白	43.0KD		有	有
牛碳酸酐酶	31.0KD		有
人生长激素	22.0KD
大豆胰蛋白酶抑制剂A	20.1 KD	有	有
鸡蛋清溶菌酶	14.4KD	有	有
人工合成肽1	7,823D	有
人工合成肽2	5,856D	有
人工合成肽3	3,313D	有

产品组成：

成分	A型	B型	C型
蛋白分子量标准A型(低分子量)	15T	-	-
蛋白分子量标准B型(中分子量)	-	20T	-
蛋白分子量标准C型(高分子量)	-	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

使用方法：

一、干粉型的使用：
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2．沸水浴中加热 5分钟。
3．短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
4．使用时每次取一管，室温放置直到液体融化后，沸水浴中加热3～5分钟，即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用：
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

疑难解答：
1.分子量不同，SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等物点，是常规蛋白染色液的替代品。


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N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N"-4-丁磺酸 Brij-35 161308-36-7
ARB13465 鸡抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)酶联免疫定量检测 Chicken anti-thrombin Ⅲ,at-Ⅲ ELISA KIT
ZCBTH03 高比活牛凝血酶 500ku
BL0932 RBITC标记兔抗山羊IgG抗体
BTN80810 一站式SDS-PAGE电泳套装 One-Stop SDS-PAGE Pack
KT221 Golden Easy PCR System
改良Gram-Weigert革兰染色液(**(代"胺")结晶紫法)   5×50ml
ARB11045 人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)代做ELISA实验 Human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,hfe2 lisa kit
ARB14204 小鼠组蛋白H3(Histone-H3)血清中含量检测 
ARB13735 兔脂蛋白*(代"磷")脂酶A2(Lp-PLA2)定量分析 Rabbit  lipoprotein-associated phospholipase a2 ,lp-pla2
植物磷酸化蛋白提取试剂盒 Plant Phosphorylated protein extraction kit  50T|100T
T4 DNA ligase 100U
ARB13304 小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)酶标法分析 Mouse phospho protein kinase c,p-pkc ELISA KIT
ARB11982 大鼠FMS样酪*酸激酶3(Flt3)酶免分析 Rat fms-like tyrosine kinase 3,flt3 ELISA KIT
PY02-172  欧氏液  100克  
3,5-二硝基水杨酸 L-Lactide 609-99-4
2,2-二羟基联*(代"*") Carboxymethyl Chitosan 1806-29-7

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