北京现货快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京现货快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料)特价优惠在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京现货快速实时荧光定量PCR预混体系(高含量ROX校正染料)特价优惠
编号：WE0143
规格：5ml
品牌：百奥莱博
英文名：BaFaSYBR Mixture(High ROX)
  本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品所含荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活仅需在95℃孵育20s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟，大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制了非特异产物的产生，并显著提高PCR的扩增效率。该产品应用范围广，适用于普通和快速定量PCR程序，可适用于无需ROX校正的所有荧光定量PCR仪。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0141)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0142)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0143)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0141-5ml	WE0142-5ml	WE0143-5ml
2×BaFaSYBR Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaFaSYBR Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX.

2、PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	20 s
变性	95℃	3 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	30 s
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、20s条件下实现酶的活化。在此条件下，大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板，可将预变性时间延长至1分钟，以使起始模板充分解链。若高温处理时间过长，会对酶的活性造成影响。可根据模板情况确定最佳的预变性时间。
2)建议采用两步法PCR反应程序，退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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2-*基吖啶酮 dFdCyd 27918-14-5
ARB10596 人血小板衍生生长因子(PDGF)免费代测 Human platelet-derived growth factor,pdgf ELISA KIT
ARB12140 大鼠生长激素释放多肽(GHRP)含量检测 Rat growth hormone releasing Peptide,ghrp ELISA KIT
ARB13290 小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)检测服务 Mouse thrombin-antithrombin complex,tat ELISA KIT
SJ0089 Cyclosporin A  环孢菌素A(环孢霉素)
BL0962 封闭山羊血清正常(原液)
ARB10477 人白介素17(IL-17)ELISA代测服务 Human interleukin 17,IL-17 ELISA KIT
酸性品红 DL-Pyroglutamic acid 3244-88-0
EM101 甲基化特异性PCR试剂盒
*并咪唑 Gallamine triethiodide 51-17-2
3,5-二*水杨酸 DL-Malic acid 320-72-9
曲*胸苷 N-P-K 70-00-8
BTN130517 环氧基磁珠 Magnetic beads,Epoxy
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L-亮*酸甲酯盐*(代"酸")盐 PGA 7517-19-3
ARB12338 大鼠间羟肾上腺素(MN)含量测试 Rat  metanephrine ,mn ELISA KIT
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·Western抗体稀释液
编号：WE0295
英文名称：Western Antibody Dilution Buffer
规格：100ml
  在蛋白印迹(Western Blot , WB)实验中，一抗和二抗通常需要适当稀释使用。本公司生产的WB抗体稀释液可用于蛋白印迹时抗体的稀释和配制，稀释和配制的一抗或二抗可以在4℃保存和使用不少于1周，可以反复2-3次用于蛋白印迹，节约您宝贵的抗体。本产品仅用于WB实验中的抗体和标记物的稀释。

注意事项：
1、本产品属蛋白制剂，室温放置过久易导致蛋白的降解和活性丧失。
2、为了能使抗体可以反复多次使用，建议尽量在2～8℃进行一抗和蛋白膜的结合反应，以减缓一抗的衰减速度。
3、本产品含防腐剂，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤：

1．临用取出本产品，颠倒数次以混匀，取适量用于抗体稀释。一抗和二抗的稀释比例请参照厂家使用说明。
2．一次实验结束后，可以回收抗体稀释液，2～8℃保存，一周内可用于下次的WB。

储存条件：2～8℃


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HC0195 记号笔(红色)
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ARB13735 兔脂蛋白*(代"磷")脂酶A2(Lp-PLA2)酶联免疫定量检测 Rabbit  lipoprotein-associated phospholipase a2 ,lp-pla2
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BTN90309 红细胞裂解液B型(流式细胞分析用) Red Cell Lysis Solution,Type B
*啶酮酸 Enzyme Stabilizer DPD 389-08-2
HC0229 加样槽(可高压灭菌)

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