北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)大量库存促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)大量库存促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)大量库存促销
品牌：百奥莱博
规格：1ml|5ml
产地：国产|进口
编号：WE0125
  本品是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系，具有高保真性、高延伸性、低偏好性的特点，对复杂的DNA模板(如高GC含量模板)有均衡的扩增效率，特别适合于二代建库中多重PCR的扩增。

本品所含的高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，扩增范围更广泛。本产品有效提升了基因组中高GC或高AT区域的扩增效率，降低扩增偏好性从而提高测序覆盖度。

产品组成：

 

组份	1ml	5ml
2×HiFi PCR Mix	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意事项：
1、该产品不适用于有修饰的引物。
2、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
3、避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系
2×HiFi PCR Mix	25μl
Primer Pool	0.1 -0.3μM
DNA or cfDNA	5ng-100ng
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	2 min
变性	98℃	20 s	30-40 个循环
退火延伸	65℃	90 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)大量库存促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)
编号：WE0175
英文名称：Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
规格：50次|200次
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血，最高得率可达30μg，可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA，纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。

试剂盒组成：

组份	50次	200次
Buffer RCL	125ml	2×260ml
Buffer GR	15ml	50ml
Buffer GL	15ml	50ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml	52ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml	50ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	12.5 mg	50 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml	5ml
吸附柱 DM及收集管	50套	200套

产品特点
1、纯度高：提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大：可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强：适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。

自备试剂：无水乙醇

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。

操作步骤：
1、样品处理：
1.1、提取200 ul血液样品时，向离心管(自备)中加入样本后，可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时，加入Buffer GR补足至200μl，再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时，加入1~2.5倍体积的Buffer RCL，轻轻涡旋或颠倒混匀，12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，小心吸弃上清液，如果沉淀中还有红色，可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR，震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血，其红细胞为有核细胞，血液样本量为5-20μl，可加入Buffer GR，补足至200μl后进行后续实验。
注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ，混匀。
3、加入200μl Buffer GL，震荡至彻底混匀。
注意：不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇，颠倒混匀数次。短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组，建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度，可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。


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·抗HA标签单克隆抗体
编号：WE0349
英文名称：Anti HA-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的HA标签，而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的HA-Tag融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成流感病毒血凝素多肽(YPYDVPDYA)
应用范围：
WB(1：500-5000)
ELISA(1：200-20000)
IP(2 µg-5 µg)

·BaldStar Taq DNA Polymerase
编号：WE0111
英文名称：BaldStar Taq DNA Polymerase
规格：500U|2500U
  BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效的Taq DNA Polymerase，在常温下酶的活性被完全封闭，使得该酶在低温或常温下没有活性，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的缓冲体系使酶的应用更为广泛，使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板，均能高效扩增。用本品进行PCR扩增，PCR产物3"末端含有A，可直接用于T/A 克隆。本产品特异性强，PCR扩增后无需胶回收去除杂带，可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR、Real-time PCR、多重PCR、基因芯片分析和SNP检测，特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

产品组成：

组份	500 U	2500U
BaldStar DNA Polymerase，5 U/μl	100μl	5×100μl
5×BaldStar PCR Buffer	1.9ml	5×1.9ml

注意：本产品的5×BaldStar Taq PCR Buffer中含有8.5mM*离子。

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、SDS-PAGE检测纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残留DNA；
4、能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
5×BaldStar PCR Buffer	10μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
BaldStar DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度，请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30-60 s，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaldStar Taq DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


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BL1317 dNTPs Mix(2.5mM each)
BFD051 呋*(代"喃")西林快速检测卡
PY02-119  *化*三糖铁琼脂  250克  
25322-68-3 聚乙二醇6000 PEG6000
ARB13319 山羊促生长激素释放激素(GHRH)含量测试 Goat growth hormone releasing hormone,ghrh ELISA KIT
F050301 兔IgG抗体 Rabbit IgG
9003-39-8 PVP40000  聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮
ARB14010 绵羊白介素2(IL-2)酶标法分析 Sheep interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
9007-83-4 γ-球蛋白 γ-Globulins from bovine blood
62625-32-5 *甲*(代"酚")绿
16178-48-6 二磷酸腺苷二* ADPNa2
ARB11921 人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)elisa测定使用说明书 Human myelin basic protein autoantibody,mbp ELISA KIT
91510-62-2 D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid
PY01-005  牛肉蛋白胨  250|500克  
盐*(代"酸")付玫瑰**(代"胺") Indoxyl-Glucuronide 569-61-9
ARB13765 鸭主要组织相容性复合体(MHC)Elisa分析 Duck major Histocomp*(代"a")tibility complex,mhc ELISA KIT

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