- ￥1248
- 西格
- XG-P2816
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
56
- 保质期：
12 个月
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1ml×5
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| XG-P2816 | 2×Pfu PCR MasterMix（含染料）3×Taq Mix高保真预混液 | 1ml×5 |
制品说明：
本产品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。
本产品使用方便快捷，能避免 PCR 操作过程中的污染，使用时只需取适量2×Pfu PCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。2×PfuPCR MasterMix可以纠正DNA扩增过程中的碱基错配，其PCR产物为平端，可直接用平端载体克隆。
本产品有含染料和不含染料两种。含染料产品中有两种染料|（绿色染料和黄色染料），在电泳时会分开以监测迁移进度。青色的染料在1%的琼脂糖凝胶中与3-5kb DNA片段的迁移率相同。黄色的染料在1%的琼脂糖凝胶中比引物迁移得快（＜50bp）。
产品内容：0.05units/μl Pfu DNA Polymerase (recombinant)、 4mM MgCl2、0.4mM dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)
质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余 DNA ；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
适用范围：
基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测，半定量PCR实验和微量DNA的检测。
DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高（>60%），有二级结构等的扩增：DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等。PCR产物不带A，纯化后可直接用平末端载体克隆。
PCR反应基本步骤：
一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成，每个循环包括以下3个步骤：
变性(Denaturation)：
利用高温（93-98℃）使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟，接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。
退火或称接合,复性(Annealling)：
在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。
延伸(Extension)：
DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr（来自于嗜热菌Thermus brockianus）约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。
PCR 反应需要使用哪些试剂？
一、模板DNA：PCR反应需要模板DNA，如从细胞、组织、血液中提取DNA等；
二、引物：PCR反应的两个引物，分别与模板DNA的两端配对扩增所需的特定区域，引物也可以合成为TA克隆等过程中使用到的引物；
三、dNTPs：PCR反应中需要四种dNTPs，包括脱氧腺苷酸（dATP）、脱氧胸苷酸（dCTP）、脱氧鸟苷酸（dGTP）、脱氧胞嘧啶酸（dTTP），用于细胞分裂、DNA合成等生物学过程，用于PCR扩增的模板DNA链的延伸和扩增；四、Taq DNA聚合酶：PCR反应需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，还有一些其他种类的聚合酶如PFU、Phusion等，用于扩增DNA链；
五、PCR buffer溶液：对PCR反应具有缓冲作用，调节反应pH，硫代硫酸氢盐SDS、小分子有机化合物如甲醛，可增强PCR反应特异性，从而提高反应效率；
六、酶切体系：PCR扩增往往涉及到重组、构建和测序等等实验步骤，常常需要进行酶切操作。
七、MARK:一种分子量标准，用来判别DNA片段大小的工具。
八、DNA纯化试剂盒：用于纯化PCR反应产物；
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文献和实验5 min 结果：可见Bioteke 2×power Taq PCR MasterMix试剂对于原核或真核生物DNA均可高效。相较于同类的taq mix的扩增效率更高，且对于高GC含量也可得到很好的扩增。取扩增产物10 μL用1%琼脂糖凝胶电泳如图可见明亮条带。 三、 cDNA扩增 人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA扩增1.2 kbp片段 模板：人类胎盘提取的总RNA反转录的cDNA 200 ng/50 μL Primer： PrimerF
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接
，切除标签，并通过质谱仪检测。如果你们实验室没有质谱仪，而又想开展多重分析，那么下面的一些方案可能适合你。 罗氏应用科学部的Light Cycler 480 Probes Master Mix能成功支持4重反应，甚至达到5重。这是一种即用型的反应预混液，包含了FastStart Taq 热启动型DNA聚合酶，它能减少非特异产物的形成，从而显著改善PCR的特异性和灵敏度。 Bio-Rad的iQ Multiplex Powermix能检测最多4个目标，即使它们的表达量相差106倍
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