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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
2×RealStar Green Fast Mixture UNG(with ROX II)
- 库存:
大量
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
ml/盒
【产品概述】
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文献和实验Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
设置(program setup)。我们以 ABI StepOne为例,详细看一下反应设置: A. 首先是实验目的选择:定量还是其他。我们命名为“BioTeke”,进行“定量”实验。 B. 实验方法的选择:我们选用的比较Ct的SYBR Green方法, Fast程序,以cDNA为模板进行。 C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。 3. 仪器设置 所有仪器的操作都基本一致。设置的时候包括反应板设置(plate setup)和程序设置(program setup)。我们以 ABI StepOne 为例,详细看一下反应设置: A. 首先是实验目的选择:定量还是其他。我们命名为「BioTeke」,进行「定量」实验。 B. 实验方法的选择:我们选用的比较 Ct 的 SYBR Green 方法, Fast 程序,以 cDNA 为模板进行。 C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称。 D. 样品的设置:包括
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