
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel K
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
按说明书
- 保质期:
按说明书
- 英文名:
//
- 库存:
大量
- 供应商:
普利莱
- 规格:
40-60块小胶
组成:
| 产品名称 | 包装 | 保存条件 |
| 30%凝胶配置缓冲液(29:1) | 100 ml | 2-8℃ 避光 |
| 分离胶缓冲液 | 80 ml | 室温 |
| 浓缩胶缓冲液 | 25 ml | 室温 |
| APS | 0.5 g | 室温 |
| 凝胶配置固化剂 | 1 ml | 室温、避光 |
操作步骤:根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度,不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围参考附表1。
1.灌制分离胶(试剂使用量参考附表2)
(1)参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
(2)将不同体积的30%凝胶配置缓冲液(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。
(3)加入10%APS和凝胶配置固化剂,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。
(5)静置30-60min,至分离胶凝固。
2.灌制浓缩胶(试剂使用量参考附表3)
(1)去除覆盖在分离胶上的水层,并用滤纸吸干,水份吸不干,可能会导致浓缩胶和分离胶分开。
(2)将不同体积的30%凝胶配置缓冲液(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。
(3)加入10%APS和凝胶配置固化剂,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。
(4)将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,插入样品梳,避免产生气泡,静置20-30min,直至浓缩胶聚合。
(5)待凝胶聚合后,小心拔下梳子,以免破坏加样孔。
(6)进行常规电泳。
注意事项:
1.10%APS配置好后,应当-20℃保存,并且应尽量减少室温存放时间,以防失效。
- 凝胶配置固化剂易挥发,使用后请拧紧瓶盖。
- 凝胶凝聚的速度与温度等关系密切,可通过调节APS和TEMED的用量,控制凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。
- 30%凝胶配置缓冲液,凝胶配置固化剂等有毒,操作时请穿实验服并戴手套。
- 在凝胶配制过程中,应尽量避免产生气泡。
- 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不宜过快。
北京普利莱基因技术有限公司坐落在北京中关村高新技术园区,由数名具有精深的学术研究能力和产品开发经验的留美博士创建,先后获得国家及中关村高新技术企业认证,依靠世界领先的技术和理念为支撑,致力于打造生命科学研究领域高品质生物试剂产品和技术服务,成为有国际影响力的、对生命科学研究和人类健康有巨大推动作用的生物技术公司。
经过十几年积累和技术攻关,普利莱以国际产品为标准,全面完善生产流程和产品质量控制体系,并利用自身优势不断整合国内外资源,相继推出数百多种具有自主知识产权的科研试剂和试剂盒。产品范围由创建初期的蛋白质研究试剂,扩展到细胞生物学、分子生物学、生物化学、免疫学和实验医学等各类研究领域。建立了基因检测、蛋白印迹、免疫组化、基因克隆与表达、抗体制备和各类生化指标检测服务平台。
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文献和实验- Zhao W, Gao X, Qiu S, et al. A subunit of V-ATPases, ATP6V1B2, underlies the pathology of intellectual disability[J]. EBioMedicine, 2019, 45: 408-421.
Reproducible purification of DNA and RNA in 96-well format. Genomic DNA and total RNA were purified from mouse tissues using the AllPrep DNA/RNA 96 Kit. A Purified DNA samples were analyzed on a 0.8% agarose gel. B
prior to the staining step. Failure to do so may cause a large amount of streaking and smearing at the base of SDS-PAGE gel. We usually fix our gels initially in methanol/acetic acid/water for at least 45 mins to remove them. Interfering Substances. a Lipids b
Denaturing Discontinuous Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE)
until the bottom of the gel is reached (1 hour). Recipes used in SDS-PAGE SEPARATING GEL a Final acrylamide concentration in the separating gel (%) b Stock Solutions 5 6 7 7.5 8 9 10 12.5 13 15 30% acrylamide/ 0.8% bisacrylamide 5.00 6.00 7.00












