北京现货TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)促销

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北京百奥莱博专业生产供应北京现货TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)促销，我公司销售全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)促销
规格：20T
英文名：TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC)
品牌：百奥莱博
编号：SY0475
本试剂盒应用范围广，可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)细胞凋亡检测试剂盒（FITC）可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是在末端脱氧核糖核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因组DNA断裂时暴露出的3´-羟基（3´-OH）末端掺入FITC-12-dUTP，从而可以用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

本试剂盒对标记反应进行了优化，采用最佳比例的FITC-12-dUTP和未标记dNTP进行3’-OH末端的核苷酸掺入，使得同一个断裂的DNA*(代"片")段末端可以形成更长的“标记尾巴”。该“标记尾巴”减少了相邻掺入dNTP上标记基团的空间位阻，增加每个断裂片段上的荧光基团数目，降低荧光基团相邻后可能造成的聚集和淬灭，从而提高检测灵敏度，减少非特异性反应。

试剂盒组份：
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl

注意事项
1）需自备用于洗涤细胞的PBS，用于封片的抗荧光淬灭封片液，用于固定的4%多聚甲醛。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，有效期一年。

更多有关北京现货TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC)促销的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·Hoechst 33258 染液(1mg/ml)
编号：SY0562
规格：1ml
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可用于活细胞或组织的细胞核染色。

分子式：C25H24N6O·3HCl
分子量：533.88
CAS：23491-45-4
纯度：≥95%（HPLC）
储存条件：-20℃避光干燥，有效期一年。
结构式


注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

·高保真DNA聚合酶
编号：SY0057
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：100U
Pfu DNA Polymerase 是基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶，具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性，可用于几乎所有PCR反应。其行进性 (processivity)得到了大幅度提升，即使是非常复杂的模板，也能准确快速的完成反应。其错配率是普通Taq酶的1/53，是Pfu酶的1/6；

与上一代Pfu DNA Polymerase相比，Pfu中添加了独特的延伸因子、特异性促进因子以及平台期解抑制因子，使其长片段扩增能力、扩增特异性性以及扩增产量方面得到了大幅度提升：1）使用λDNA、质粒等简单模板，Pfu 可以有效扩增长达40 kb的片段；2）使用基因组DNA等复杂模板，Pfu可以有效扩增长达20 kb的片段；3）使用cDNA模板，Pfu可以有效扩增长达10 kb的片段。此外，Pfu对PCR抑制剂具有良好的抵抗能力，可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。II Pfu中添加了在常温下能够抑制其5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的两种单克隆抗体，可进行高特异性的热启动PCR。

该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，扩增产物为平端。

产品组份：
Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)：100 μl
2×PCR buffer：1.25 ml×2
dNTP Mix(10 mM each)：100 μl
10×Loading buffer：1.25ml

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，加入2U本品，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测1：50 μl PCR体系中加入1U本品，以100 ng人基因组DNA为模板扩增30个循环，1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2：50 μl PCR体系中加入1U本品，以10 ng λDNA为模板扩增30个循环，1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的15 kb条带。

1 推荐反应体系及反应程序

1.1 反应体系配制：
a. 所Pfu DNA Polymerase 是基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶，具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性，可用于几乎所有PCR反应。其行进性 (processivity)得到了大幅度提升，即使是非常复杂的模板，也能准确快速的完成反应。其错配率是普通Taq酶的1/53，是Pfu酶的1/6；

与上一代Pfu DNA Polymerase相比，Pfu中添加了独特的延伸因子、特异性促进因子以及平台期解抑制因子，使其长片段扩增能力、扩增特异性性以及扩增产量方面得到了大幅度提升：1）使用λDNA、质粒等简单模板，Pfu 可以有效扩增长达40 kb的片段；2）使用基因组DNA等复杂模板，Pfu可以有效扩增长达20 kb的片段；3）使用cDNA模板，Pfu可以有效扩增长达10 kb的片段。此外，Pfu对PCR抑制剂具有良好的抵抗能力，可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。II Pfu中添加了在常温下能够抑制其5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的两种单克隆抗体，可进行高特异性的热启动PCR。

该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，扩增产物为平端。

产品组份：
Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)：100 μl
PCR buffer：1.25 ml×2
dNTP Mix(10 mM each)：100 μl
10×Loading buffer：1.25ml

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，加入2U本品，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测1：50 μl PCR体系中加入1U本品，以100 ng人基因组DNA为模板扩增30个循环，1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2：50 μl PCR体系中加入1U本品，以10 ng λDNA为模板扩增30个循环，1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的15 kb条带。

1 推荐反应体系及反应程序

1.1 反应体系配制：
a. 所有操作请在冰上进行，各组分解冻后请充分摇匀。为了防止II Pfu DNA Polymerase的校对活性降解引物，请将聚合酶最后加入反应体系中。各组分使用完毕后及时放回-20℃。、

ddH2O	to 50 μl
2×PCR buffer a	25 μl
dNTP Mix(10 mM each)b	1 μl
模板DNAc	optional
引物1(10 μM)	2 μl
引物2(10 μM)	2 μl
Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)d	1 μl

【注】：a. 2×II PCR buffer中已含有Mg2+，终浓度为2mM。
b. 请勿使用dUTP和带有尿嘧啶的引物或模板。
c. 不同模板最佳反应浓度有所不同，下表为50 μl反应体系推荐模板使用量：

基因组DNA	50 ng～400 ng
质粒或病毒DNA	10 pg～30 ng
cDNA	1～5 μl(不超过PCR反应总体积的1/10)

d. 推荐的酶的终浓度为1U/50 μl反应。然而，根据扩增子的长度和复杂程度不同，可将酶的使用量在0.5-2U/50 μl反应之间进行优化。II Pfu DNA Polymerase具有较强的校对活性，因此，如扩增产物需要进行TA克隆，加A之前必须进行DNA纯化。
1.2 一般PCR反应条件设置：

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性a	95℃	30 sec～3 min	1
变性	95℃	15 sec	25～35循环
退火b	56℃～72℃	15 sec
延伸c	72℃	30～60sec/kb
彻底延伸	72℃	5 min	1

【注】：a. 推荐大多数模板的预变性温度为95℃，时间为：质粒或病毒DNA，30 sec，基因组/cDNA为3 min；
b.一般来说，退火温度设置为引物Tm值。如引物Tm值≥72℃，可删除退火步骤，直接进行后续的延伸步骤(两步法PCR)。如果需要，可以建立一个温度梯度反应去寻找最适引物模板结合温度。此外，退火温度直接决定扩增特异性。如发现扩增特异性差，可适当提高退火温度，每次+3℃。

c.延长延伸时间有助于提高扩增产量。
1.3 长片段PCR 扩增：
*使用高质量的模板，提高模板使用量；
*使用长引物。
*当推荐程序无法进行扩增时，建议尝试下述Touch Down两步法PC
*Touch Down两步法推荐反应条件设置：

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	3 min	1
变性	95℃	15 sec	5
延伸	74℃	60 sec/kb
变性	95℃	15 sec	5
延伸	72℃	60 sec/kb
变性	95℃	15 sec	5
延伸	70℃	60 sec/kb
变性	95℃	15 sec	5
延伸	68℃	60 sec/kb
彻底延伸	68℃	5 min	1

2. 复杂样品的扩增
Pfu具有卓越的长片段扩增能力、扩增特异性以及扩增产量，对许多PCR抑制剂具有良好的抵抗能力，可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。推荐扩增的样品类型：

样品类型	扩增方式	推荐操作方式（50µl体系）
全血	直接扩增	吸取1-5µl作为扩增模板
滤纸干血渍	直接扩增	剪取1-2mm2滤纸作为扩增模板
培养细胞	直接扩增	取少量细胞作为扩增模板
酵母	直接扩增	挑取单克隆或1µl菌液作为模板
细菌	直接扩增	挑取单克隆或1µl菌液作为模板
霉菌	直接扩增	挑取少量作为扩增模板
精液	直接扩增	吸取少量作为扩增模板
浮游生物	直接扩增	挑取少量作为扩增模板
植物组织	直接扩增	剪取1-2 mm2 组织作为扩增模板
小鼠尾巴	裂解后吸取裂解液扩增	吸取1-5 μl 裂解液作为扩增模板*
食品	裂解后吸取裂解液扩增	吸取1-5 μl 裂解液作为扩增模板*

*样品裂解液制备过程：

**Lysis Buffer：20 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1 mM EDTA，0.1% SDS，pH 8.0。(需自备)

引物设计注意事项
1）引物3’端最后一个碱基最好为G或者C；
2）引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配；
3）引物3’端尽量避免发夹结构出现；
4）引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5）引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6）引物的GC含量控制在40%-60%之间；
7）正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。


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·DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号：SY0668
英文名称：DyLight 405-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格：100μl
本品为DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L)。推荐稀释比例：1:25～100。

本品是使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的兔IgG分子，也会与其他兔免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。该荧光基团Amax（最大激发波长）为400nm，Emax（最大发射波长）为420nm。

本品适合做单标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种的血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸钠，0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：DyLightTM 405, Amax=400, Emax=420
防腐剂：0.025% 叠氮化*(代"钠")
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


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耐尔蓝A dTDP 3625-57-8
茜素络合指示剂 Erioglaucine disodium salt 3952-78-1
BL0851 兔抗小鼠IgG纯化抗体
1409-69-2 亲和素 Avidin
CBZ-L-苏氨酸 CHC 19728-63-3
ARB13564 兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)酶联免疫定量检测 Rabbit soluble vascuolar cell adhesion molecule 1,svcam-1 ELISA KIT
PY02-140 TTC琼脂基础 250克
ARB10425 人布鲁氏杆菌IgG elisa检测说明书 Human brucella igg,IgG ELISA KIT
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CYB166022-D 兔抗牛IgG-GOLD

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