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- biodai
- D21013
- D21013
- 2026年01月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit
- 规格：
30次反应
BIOG TUNEL细胞凋亡检测试剂盒FITC
TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit
产品简介
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。本试剂盒采用TUNEL法，采用高活性的基因重组末端脱氧核糖核苷转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT），在凋亡细胞断裂的DNA 3’-羟基（3’-OH）末端催化掺入FITC-12-dUTP，通过检测FITC-12-dUTP标记的DNA片段来检测细胞凋亡。FITC-12-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察，也可用流式细胞仪检测。试剂盒经反复多次优化，FITC-12-dUTP标记和未标记dNTP处于最佳搭配比例，这样在进行3’-OH末端核苷酸掺入时，同一个断裂的DNA片段末端可以有更多的FITC-12-dUTP掺入，从而大大提高了检测的灵敏度，减少了背景反应。再加上我们高活性的TdT酶，使得本试剂盒的检测信噪比得以大幅提升，显著优于部分同类试剂盒。
产品特点
1.荧光素标记与未标记dNTP的比例经多次优化，高信噪比，高灵敏度；
2.TdT酶为基因工程重组产品，活性高，荧光掺入效率高，荧光背景低；
3.适用于涂片、爬片、石蜡切片、冰冻切片、流式细胞等。
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
用了许多方法检测小鼠的肝脏、脑部、睾丸等组织的细胞凋亡，其中 TUNEL 法做的最多，我购买的试剂盒主要是 roche、 promega 公司，结果大多数成功，偶尔也有失败，下面我把实验中的关键问题与大家共享一下，同时也希望能对初学者有所帮忙。 TUNEL 法的实验原理 基本原理：对不同组织切片先增加细胞膜通透性，然后让 rTDT 和生物标记的 dTUTP 进入细胞内，在 rTDT 的辅助下 dTUTP 与核断裂的 DNA 3』-OH 结合，再用 HRP 标记的链霉
【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用
mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒，想研究某种材料的细胞毒性，看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测，结果显示材料基本无毒性。 由于条件限制（流式细胞仪在我们学校另一个校区）不能及时进行检测，前两天进行了一次实验，是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理，检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态，个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关（悬浮在Annexin V结合液中
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