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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Tunicamycin Solution
- 库存:
876
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")衣霉素溶液厂家直销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:衣霉素溶液厂家直销
英文名:Tunicamycin Solution
规格:1mL
编号:BTN120702
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本产品为5mg/mL的衣霉素溶液,溶剂为甲醇。衣霉素(链病毒菌素;Nsc177382;Aids010655),分子式:C37H60N4O16,分子量:816.89,CAS号:11089-65-9 。为放线菌Streptomyces lysosuperficus产生的核苷酸抗生素。可抑制具有被膜(envelope,含糖蛋白)的病毒的繁殖。作用机理是抑制合成糖蛋白糖链必需的拟脂(多萜醇,dolichol)中间产物的生成。常作为研究糖蛋白的工具,能通过抑制N-乙酰*基葡萄糖-1-磷酸到一磷酸长醇的转移从而阻止糖蛋白的形成。
储存条件:低温运输,4℃避光保存,有效期6个月。
我公司的衣霉素溶液厂家直销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·大肠杆菌Rosetta(DE3)化学感受态细胞
编号:BTN121004
英文名称:E.coli Rosetta(DE3) Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达107。本感受态细胞适用于真核蛋白表达,具有*霉素抗性。
菌株基因型:F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)pRARE(argU,argW,ileX,glyT,leuW,proL)(CmR)
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
衣霉素溶液厂家直销关键词:11089-65-9,衣霉素溶液,Tunicamycin Solution
·一站式miRNA柱式提取试剂盒
编号:BTN80104
英文名称:One-stop miRNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。
试剂盒特点:
1.一步法直接分离纯化小RNA,比两步法(先分离总RNA和再纯化其中的小RNA)和PAGE电泳回收法更简单。得到的小RNA长度大部分在200nt以下,包括5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 柱式操作,比miRNA提取试剂盒更加简单快捷,整个过程只需要十多分钟。
3.适用范围广,可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。
4.小RNA 纯净,OD260/280一般都在1.9以上。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6. 无基因组DNA的污染。
7.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 100套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
由于离心吸附柱的吸附量限制,本产品每次提取只能处理100mg左右的各种组织,可以在1.5mL塑料离心管中。如果处理样品量大,请分成很多相当于微量提取的量进行,最后再收集在一起。
1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B按1:1的比例混合,然后根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用。注意:溶液A和溶液B混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/mL裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加1mL新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL裂解物需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000~15000g室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到一根离心吸附柱中以去除大RNA(最好标记以跟后面要用的专门吸附小RNA的另一离心吸附柱区别开来,本试剂盒提供的离心吸附柱之间没任何区别,可以随机选一个做大RNA 吸附,另一个做小RNA 吸附)。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 12000~15000g室温离心半分钟,收集管中的穿透液。大RNA 及DNA将与离心吸附柱的膜结合,小RNA 将存在于穿透液中。但由于离心吸附柱的最大吸附能力为40μg动物RNA,20μg植物RNA,如果样品中的大RNA含量高于上面数值,则穿透液中将同时含有大RNA和小RNA,在此情况下,穿透液需要再次重复上柱以去除大RNA。由于此时离心吸附柱已经吸附了大RNA,所以需要预处理(具体步骤见本手册最后的附录)。
6.在最后得到的不含大RNA的穿透液中加等体积的溶液C,混匀。此时溶液的总体积约1.5mL。
7. 先转移约0.75mL 到一新的离心吸附柱中。注意:不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱。12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
8. 将上步上柱剩余的样品转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
9. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加 0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。此步一般可以省略。
11. 12000~15000g室温离心半分钟以甩出残联液体。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响miRNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μLRNA 洗脱液。
13. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为miRNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
附录:
1. 将结合有大RNA和DNA的离心吸附柱中加入0.1mL自备的超纯水,12000~15000g室温离心半分钟,弃收集液。
2. 再加 0.1mL自备的超纯水,重复上步一次。
3. 将第5 步的得到、需要进一步去除其中大RNA和DNA污染的穿透液直接上柱,12000~15000g室温离心半分钟,收集穿透液(此穿透液含小RNA)。
4. 如果大 RNA 已经去干净,可以直接进入第6 步;如果大RNA 没有去除干净,则用本附录1-2的方法处理离心吸附柱,然后再将此穿透液加入(接本附录第3 步)。一般样品只需要额外处理一次就可以去除全部的大RNA污染。
衣霉素溶液厂家直销关键词:11089-65-9,衣霉素溶液,Tunicamycin Solution
·抑*肽酶溶液(5mg/mL)
编号:BTN130536
英文名称:Bestatin Solution
规格:5mL
本产品为5mg/mL抑*酶的甲醇溶液,工作浓度为40μg/mL(130μM)。抑*肽酶(Bestatin),又称*肽酶抑制剂、乌*美司(ubenimex),分子量是308.4,是一种竞争性的蛋白酶抑制剂,可抑制*肽酶B、白*酸*基肽酶、三肽*肽酶和哺乳动物细胞表面的*基肽酶等蛋白酶的活性,不能抑制羧肽酶。
储存条件:低温 运输,-20℃保存,有效期一年。
·TRIzol试剂伴侣
编号:BTN81027
英文名称:TRIzol-Mate
规格:50次
TRIzol是用于总RNA提取(主要是动物总RNA提取)的著名产品,具有广大的客户群。但其缺点之一是一直没有柱式升级产品,客户仍然要使用既繁琐又费事的非柱式操作(另一缺点是不能用于富含多糖和多酚的材料)为解决此问题,我们特推出本产品,其操作流程如下:
产品特点:
1. RNA 质量更好,因为操作简短减少了RNA在提取过程中的降解。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在 1.9以上,比经典 TRIzol法得到的更纯。
3. 专门的洗涤条件能有效去除基因组 DNA,进一步减少其对 RNA的污染。
4.适用于其他基于酸酚/ 异硫*酸胍提取原理的RNA提取产品,包括TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent等。
5.可以省略*仿处理步骤,避免接触有毒试剂(但效果稍差)。
6.跟TRIzol 结合使用,把经典操作变成了柱式操作,简化了实验流程,用户可以节约30分钟的时间。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 硅胶膜离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用及效果:
使用方法:
1. 按 TRIzol的使用说明书进行总 RNA提取到加*仿之前一步。
2. 如果需要加*仿,则继续按TRIzol的使用说明书操作,用*仿处理裂解液离心后得到上清液。如果省略*仿处理步骤,则需要将裂解物直接离心。
3. 将经过*仿处理得到的上清液或没有经过*仿处理直接离心得到的裂解液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:如果是经过*仿处理,则离心后,下层有机相和中间层将含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
4. 加入等体积的溶液A,颠倒混匀 30秒。
5. 根据混合物的多少,一次或分两次转移到离心吸附柱中。
6. 每次转移后,需要13000-15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
7. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用0.3mL 通用洗柱液重复此步一次。
8.室温离心半分钟。此步对去除残留通用洗柱液十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的质量和使用。
9. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μl RNA 洗脱液。
10.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
11. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
12. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
13. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我公司的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的说明书进行操作。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购衣霉素溶液厂家直销。
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