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- HZbscience
- 中国/美国/德国
- HZ0138
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
半年
- 英文名：
pACGFP1-N1
- 库存：
200
- 供应商：
沪震生物
- 规格：
5ug
pACGFP1-N1
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0138 | pACGFP1-N1 | 5μg |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | CMV promoter |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,f1 ori |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳系列质粒；哺乳荧光质粒；哺乳绿色质粒 |
| 质粒大小: | 4726bp |
| 质粒标签: | C-GFP |
| 原核抗性: | 卡那霉素Kan（50μg/ml） |
| 筛选标记: | 新霉素Neo/G418 |
| 克隆菌株: | DH5α等大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃，有氧 LB |
| 表达宿主: | 293T等哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | CMV-F（CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG） |
| 3'测序引物: | Sv40-polyA-R (GAAATTTGTGATGCTATTGC) |
质粒简介
pAcGFP1-N1 encodes a green fluorescent protein(GFP) from Aequorea coerulescens(excitation maximum=475nm;emission maximum=505nm).The coding sequence of the AcGFP1 gene contains silent base changes,which correspond to human codon-usage preferences
质粒图谱
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文献和实验maoliping70：pEGFP-N1为载体表达的核蛋白要确证表达于核内的方法为用PI染色，PI只与核酸结合，在488nm激发下发红光，而GFP发绿光，红光与绿光重叠发黄光。还有以下疑问：1.作为对照的pEGFP-N1空载体转染细胞后表达的GFP蛋白为27KD，能自由通过核孔复合体，也就是说GFP在核内也有表达，那会与PI重叠发黄光影响测定吗？2.有提出GFP在细胞固定时，会从细胞漏出，那细胞本身表达的浆蛋白若分子量小，也会漏出吗？还是因为有定位信号而不漏出？3.细胞固定用的70%乙醇是直接
内切酶，为了考虑后期实验的方便性，通常会选择一个酶切效率高的酶比如说BamH1 EcoR1，另一个效率相对较低的，比如说Not 1， Kpn1。这四种我都用过，如果buffer不一样的，可以先切效率低的再切效率高的，中间切胶纯化。当然酶切效率跟载体本身结构也有关系，我用过的载体有pGBKT7，pGADT7，pEF4VH，pSeqTaq，Prolabel，pAcGFP，pTRE。其中pTRE没有成功过。2 插入片段的处理 使用高保真的酶扩增插入片段，我用过TaKaRa的primesSTAR GXL DNA
影响的。 ono1180 我想问一下，除了正规公司，什么地方能求购到比较便宜，又能够保真的质粒 lisail 我有PLEGFP-N1的病毒载体，需要的话联系我Q2427657955 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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