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- PB180227
- 武汉
- 2025年10月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 供应商：
武汉普诺赛生命科技有限公司
- 英文名：
0.25% Trypsin Solution, with EDTA, dissolved in D-Hank's
- 规格：
100mL
胰蛋白酶、胰蛋白酶溶液、0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于D-Hank's）
胰蛋白酶（Trypin）是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关，在PH 8.0和37℃时，胰酶的作用能力最强，因此使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。
一般常用胰酶的工作浓度为0.25%，而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度（0.05%）的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用，以增强解离效果。
胰蛋白酶产品信息
|
形态 |
液体 |
|
规格 |
100mL |
|
PH |
7.2-7.4 |
|
溶剂 |
D-Hank's |
|
胰酶蛋白酶浓度 |
2.5g/L |
|
EDTA•2Na |
0.2g/L |
|
酚红指示剂 |
无 |
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储存条件 |
-20℃ |
|
运输条件 |
冷冻 |
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有效期 |
12个月 |
注意事项
1、由于不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样，因此操作人员应根据实际情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况；
2、使用本产品时应注意无菌操作，避免污染；
3、不宜长时间放置于室温环境或4℃长期保存；
4、2℃～8℃中解冻，摇匀后使用，切忌反复冻融，用量较少时建议分装冻存。
5、由于D-Hank's平衡盐溶液NaHCO3含量较低（0.35g/L），因此该型胰蛋白酶溶液不能用于5% CO2的环境，若放入CO2培养相，溶液将迅速变酸，使用时应注意；
6、本产品仅用于科研或进一步研究使用，不用于诊断和治疗。
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文献和实验Near-infrared light-responsive nanocomposite hydrogels loaded with epidermal growth factor for diabetic wound healing(2025)
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。4、从温箱中取出培养瓶，向瓶底轻轻注入含20%CS及PS的DMEM培养液5ml，然后缓缓翻转培养瓶，让培养液慢慢覆盖附于瓶壁上的组织小块，置于37℃温箱内培养。5、一周后取出培养瓶，弃去瓶内培养液，Hank,s液漂洗两次后加相同的培养液5ml继续培养。以后待细胞萌出后，同样方法每周换液两次。（二）传代培养待原代培养细胞生长基本融合成片时即可传代。1、吸出培养瓶内的培养液，Hank,s液漂洗两次，向瓶内加入0.5%的胰蛋白酶溶液少许以覆盖瓶底为度。2、大约1分钟左右，镜下观察细胞胞质回缩，细胞间隙增大时
，Rb，TopoismeraseⅡ 等。 2、酶消化方法 常用 0.1% 胰蛋白酶和 0.4% 胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热至 37℃，切片也预热至 37℃，消化时间约为 5~30 分钟（胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从 0.05% 至 0.25% ）； 胃蛋白酶消化37℃ 时间为 30 分钟。皂素（Saponin）：一般使用浓度为2~10mg/ml的saponin 溶液，消化时间为室温孵育 30 分钟。 适用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen
配制。 实验室内常将胰蛋白酶和EDTA联合使用。可提高消化效率，细胞分散情况改善。 EDTA不能被血清抑制，所以消化后必须彻底清洗。 EDTA对成纤维细胞作用差。 三、胶原酶溶液 1 ．用Hank's液配制成2000U/ml 2 ．36.5度搅拌溶解1h，4度过
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