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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100 mL
胰酶EDTA溶液,0.25%是使用胰蛋白酶干粉与EDTA混合溶解而成。胰蛋白酶是来源于猪胰脏的蛋白酶混合物,经辐射灭菌。 由于其很强的消化能力,胰蛋白酶被广泛地应用于细胞解离、常规的细胞传代和原代组织的解离。根据细胞类型和实验要求的不同,用于解离的胰蛋白酶浓度也各不相同,使用者应根据相关文献和工作经验优化蕞佳使用条件。 本产品使用注射用水(Water-For-Injection)配制。 本产品关注点 含有(+) • 2.5 g/L 胰蛋白酶 • 0.38 g/L EDTA·4Na 本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。 禁止临床使用。
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文献和实验,一般多用的浓度是0.02% 可以用不含钙镁的平衡盐溶液溶解,水也可以然后灭菌分装,你可以用稍微量大一点的胰酶而不用EDTA,要是直接都用EDTA你的细胞要是都能消化下来,也是可以的,但是注意消化以后用HANKS 来清洗残留的EDTA。 wangruimishu 可能是我的细胞比较容易存活的原因吧,我只用EDTA消化,细胞长的还可以,只是感觉消化的慢 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄
问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
铵可以与活化剂钙离子结合,生成硫酸钙,如果钙离子过少会直接影响胰酶原的激活过程,按浓度量计算,将已研细的固体CaCL2慢慢加入酶原溶液中,边加边搅拌均匀。用5MNaOH溶液调PH至8.0。在酶溶液加入约5mg结晶猪胰蛋白酶,轻轻搅拌均匀,置5℃冰箱中使酶原活化。 (4)纯化:去除杂蛋白,量取胰蛋白酶溶液体积后,用5M硫酸溶液调节滤液PH至2.5-3.0,抽滤除去硫酸钙沉淀,滤液体积约1000ml,加入已经研细的硫酸铵粉末,使其溶液达40%饱和度(每升滤液加242g硫酸铵)。放置5℃冰箱中5-8h,抽滤












