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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Tranzol
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
20次
常态转化液
编号:KL51101规格:20次
英文名:Tranzol
产品简介:
常态转化液是我公司最新推出的具有自主知识产权的革命性产品,它能使各种常态的E.coli 细胞直接用于快速转化实验,使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备,保存和运输等繁琐的事情而操心,大大地缩短了基因克隆实验的时间,提高使用者的工作效率。
1.不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
2.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli 菌种包括K12系的DH5α和Tg1,B系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM,pET和系列等。
3.转化效率适中,使用10 ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在105到106 CFU/μg质粒之间),使用3-5 μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
4.单管快速操作,整个操作可以在一个1.5 mL塑料离心管中进行,最短可以在三十分钟内完成,不需要过了夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
5.稳定性好,本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
使用及效果:
将数个E.coli 菌落(或50 μ L甘油菌种液,100 μ L新鲜培养液)转入装有1 mL液体培养基的1.5 mL塑料离心管中,37℃水浴1小时,室温10000 g离心1分钟后去尽上清,加入转化液和1-10 μ L连接反应液,轻柔混匀,-20℃放置致凝,冰浴5分钟,加入1 mL 液体培养基,37℃水浴1小时,取0.1-0.3 mL涂于含相关抗菌素的固体培养基上,37℃过了夜培养后即得转化菌落。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验12 点后才睡早已常态化:「睡眠自由」—— 当代硕博最不可能的奢望
科研人的睡眠「睡不好才是常态啊」,埋头处理数据的博士生小林抬起头嘟囔了一句,算是回应了师弟对最近缺觉的抱怨。因为疫情的缘故,毕业的压力总是压在小林心头,从返校后,更是将大部分时间都花在科研上,本就不富裕的睡眠时间又被压缩了不少。但是,缺觉归缺觉,对于实验,小林还是不敢放松。做不完的实验,看不完的文献,很多时候都挤压了科研狗们为数不多的睡眠时间,但为了攒够数据,为了能够毕业,熬夜,甚至通宵都成为了科研狗们的常规操作。某乎上曾有网友提问:「科研狗睡在实验室是怎样一种体验?」,许多科研狗在问题下晒出
经常做实验,这是不是你在实验室做逆转录实验的常态?面前堆了 5、6、7、8…...管试剂,加样加的手忙脚乱,最后还加错了,模板被浪费,整个人烦躁的不行,还有一小时的反应时间,饭都吃不上了吧!△ 图片来源:站酷海洛而旁边的大师兄呢,桌上整洁干净,轻松两枪加好样上机,不到半小时就完成了逆转录全过程,开开心心去吃饭啦~连夜提取的 RNA,第二天来做的时候跑个胶发现:降解了!怎么办怎么办?!△ 图片来源:站酷海洛而出去交流学习了两个星期的师姐,化了美美的妆,淡定地从冰箱里取出走之前提取的 RNA 样本
观察到。 三.实验材料 受体菌:E.coli K12 HB101 质粒:pGLO plasmid 转化液(CaCl2) 氨苄青霉素(amp) 阿拉伯糖(ara) 培养基:固体LB、液体LB 接种环、移液器等 四.实验步骤 1. 准备平板: 每组:1块LB平板,2块LB/amp平板,1块LB/amp/ara平板 2. 准备感受态细胞:用250µl无菌水或转化液悬浮试剂盒中提供的大肠杆菌菌粉,此即感受
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