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- 中国大陆
- KL-D2424
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冷藏
- 保质期：
长期
- 英文名：
Western blocking buffer
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
100ml
封闭液(Western)
英文名：Western blocking buffer有效期:一年。
产品简介:
百奥莱博 Western 封闭液用于Western 时转移了蛋白样品的PVDF 膜或NC 膜的封闭。封闭后，可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比。按照每张膜封闭需要5-10 毫升封闭液计算，一个包装的Western 封闭液可以封闭10-20张膜。
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文献和实验llh刘丽华 各位好：我做了1个多月western blot了，内参跑得还可以，但是目的蛋白总是跑不好，今天跑出来非特异性条带很清楚，而目的条带却很淡，不知是什么原因！前一次也是这种情况，我就延长封闭时间至2h，一抗1:700，二抗1:5000，请各位高手帮忙分析一下吧！下面是我的图片，最下面，模糊的一条（靠图片中间的一条）是我的目的条带！ coffeeshine 如果非特异带很清楚，延长封闭时间没作用
样本准备 蛋白提取 所需仪器：匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF（蛋白酶抑制剂）、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子，消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液：PMSF=100：1。 1） 组织处理：首先用酒精棉消毒剪刀和镊子，取适量的组织于匀浆器中，用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。（含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆） 2） 细胞处理： A、 贴壁细胞处理：去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解
我觉得你首先应拿一个别人已经做过western blot证实条带条件好的蛋白样本来做对比，排除你在做western操作过程的问题 再考虑是你的抗体问题或者是你的蛋白样本的问题 qingdaomdbio 考虑一下封闭液有没有问题 llh刘丽华 我又摸了几次条件，延长了转膜时间，结果还不如现在的结果，我换成5%BSA封闭，结果什么也没有，关键是我现在连上面的结果都重复不出来了，我都不知道怎么办了，但是内参每次
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