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- KALANG
- 中国大陆
- KL611
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
2年
- 英文名：
Fast & Long DNA PCR MasterMix
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1ml|5ml
长片段DNA超速PCR MasterMix
规格：1ml|5ml英文名：Fast & Long DNA PCR MasterMix
本品包含超速长片段DNA聚合酶、dNTPs和优化的反应缓冲液，浓度为2×。使用时只需加入模板、引物，并补足水至Mix终浓度为1×即可。本制品含红色示踪染料，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
产品特点：
1.超快的扩增速度：延伸速度可以达到5～10秒/kb，最短半小时完成PCR。
2.突出的长片段扩增能力：可以扩增高达10kb的长片段（包括人类基因组此类的复杂模板）。
3.良好保真性：保真度是taq的3～6倍以上。
4.强大扩增能力：产量高，对于一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高模板有良好效果。
注意事项：
1.本系统扩增速度极快，短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5秒/kb延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短PCR时间。长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低可以采用15-20秒/kb延伸速度或者采用较多循环数。
2.本品产量较低时可尝试采用较长的延伸时间(如20秒/kb）和循环数（如35个）可以提高PCR产物的产量。
3.对于GC含量很高的模板，短片段预变性和变性温度可以提高到98℃和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度，应该适当延长预变性时间到5分钟，变性时间可以适当提高5-10秒。
4.如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%，按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1～1.7M。并采用降落PCR（Touchdown PCR）
储存条件：-20℃，有效期2年。
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文献和实验laide 各位PCR高手： 本人新手，想要用PCR的方法，用高保真的DNA聚合酶扩增一段长度为2700bp的DNA，用于基因克隆。但本人担心PCR后产物片段可能突变。由于没有做过，我想实验前预先评估一下整个实验的风险。故向各为有经验人士请教，用高保真的DNA聚合酶扩增，能否保证2700bpDNA不突变？还有哪些可行的措施可以保证整个PCR过程的保真性？欢迎各位高手赐教。 济南基美 循环数不宜太多，突变在PCR中是积累
，minorpolymerase) 的组合，最后得到了长达28kb的产物。由此人们开始打开长片段PCR的大门，最终科学家发展出了一种新PCR技术———长PCR(longPCR)，用于扩增大于5kb的DNA片段。至今为止，长PCR技术已成功地用于扩增人类β球蛋白基因簇22kb的DNA片段、噬菌体基因组42kb的片段和人类线粒体基因组16.3kb的片段。我是从13年开始尝试扩增长片段的，在经过一些摸索，并不断的改变PCR条件，终于扩增出8.5kb长的人类基因组DNA。经过这两年的时间，我整理了一些限制长片段PCR的因素及一些解决
. None of the published formulas for calculating annealing temperatures has been proven to give better than a rough estimate. The PCR Process In a nutshell,PCR works like this: DNA and two primers are combined in a salt solution with dNTPs and a heat stable DNA
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