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-20℃
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长期
- 英文名:
Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
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大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
1000U
小牛肠碱性磷酸酶
规格:1000U英文名:Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’ 端无磷酸基团,因而不可以和自身3’ 端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板,以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。
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文献和实验对底物作用后生成产物量的测定进行试验。 国外很多ELISA试剂采用碱性磷酸酶(AP)作为标记酶。常用的AP有两个来源,分别从大肠杆菌和小牛肠膜中提取。不同来源的酶生化特性特性略不相同,从大肠杆菌中提取的AP分子量为80000,酶作用的最适合pH为8.0;用小牛肠膜中提取的AP分子量为100000,最适pH为9.6。在ELISA中,AP系统的敏感度一般高于HRP系统,空白值也较低,但AP价格昂贵,制备结合物所得率也较HRP低。 3.2.2 抗原和抗体 制备结合物时所用抗体一般 均为纯度
oryzae)中分离的高度单链特异的外切酶。 活性:可以降解单链DNA或RNA或双链的单链区。 其主要用途有: ⑴ 在cDNA合成过程中,切开cDNA的发夹末端; ⑵ 载体构建过程中,切去DNA片段的单链尾巴, 形成平末端结构。 (三)碱性磷酸酶 从大肠杆菌中分离的细菌碱性磷酸酶(Bacterial Alkaline Phosphatase)简称BAP。 从小牛肠中分离的叫小牛肠碱性磷酸酶( Calf
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表
载玻片,制片机,湿盒,光学显微镜 1. APAAP配制:牛肠碱性磷酸酶Ⅶ型(Sigma)4.3μl或粗酶2mg溶于1ml 0.05M,PH7.6的TBS,加抗碱性磷酶单克隆抗体腹水2μl制成,临用时作1∶2~1∶4稀释。 2. AP底物配制:Naphathol(萘酚)AS-MX(Sigma) 25mg溶于1ml二甲基甲酰胺,加PH8.2, 0.1M Tris-HCl缓冲液49ml,再加Fast Red ITR (Sigma) 50mg,充分混匀,用前配制。必要时加12mg
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