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- 服务名称：
重组原核蛋白表达以及纯化
- 提供商：
威斯腾生物
重组原核蛋白表达以及纯化
服务特色：
Ø 稳定而多样的表达系统：威斯腾生物已建立整套的基因克隆与表达体系，无论是单个基因的克隆、表达与纯化，还是多个基因高通量的基因克隆、表达和纯化，均能选用适合您试验（科研项目）需要的表达系统（包括大肠杆菌、毕赤酵母、昆虫杆状病毒以及哺乳动物细胞等）和合适的表达载体为您提供优质的服务。
Ø 多种纯化方式：可为客户提供多种蛋白纯化服务，纯化方式包括亲和层析纯化、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等，客户可根据需要选择合适的纯化方式。
Ø 专业的团队和良好的信息管理体系：专业的基因克隆、蛋白表达与纯化技术人员与团队，具有丰富的表达和纯
大肠杆菌蛋白表达系统操作流程：
1、中心合成基因（另外收费）或者客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒等)
2、构建表达载体
3、筛选阳性克隆
4、表达优化和可溶性分析
5、SDS-PAGE检测表达
6、Western blot检测表达（可选）
结果提供：
１、构建的表达载体及测序报告
２、SDS-PAGE结果
３、筛选的表达菌株
４、Western blot结果
５、实验流程及结果
6、纯化后的表达蛋白
服务周期：
2个月左右
【本平台合作项目】
分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！
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文献和实验（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
高手进行补充 pET，原核表达金标准(转) pET 载体中，目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录 和翻译信号控制之下，并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen 的 pET 系统不断扩大，提供了用于表达的新技术和选择，目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点 · 是原核蛋白表达 引用最多的系统 · 在任何大肠杆菌 表达系统中，基础
重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作 （细菌内同源重组 AdEasy System ） 一 目的基因的克隆（以 pshuttle-CMV 质粒为例） 1. 选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。 2. 重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。 3. 重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。 4.
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