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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
百意欣
- 服务名称:
原核蛋白表达服务
- 规格:
10μl
原核蛋白表达服务 货号:TD-E |
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| 服 务 简 介 | |||||
| 百意欣生物技术人员拥有十年以上的蛋白表达经验,已成功交付2000+份蛋白,包括转录因子,抗原,酶,细胞因子等等。我们表达的蛋白质90%以上为上清可溶性表达,最大保留蛋白质活性。基于成熟的大肠杆菌表达及纯化服务平台, 我们向客户提供重组蛋白及其复合物在大肠杆菌中的表达与纯化服务,主要内容包括:
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| 服 务 内 容 | |||||
| 服务步骤 | 项目内容 | 周期 | 交付内容 | 报价 |
| 基因合成 | • 目的基因合成及密码子优化 | 1周 | • 构建好的表达载体一份(含目的基因序列) | 询价 |
| 载体构建 | • 克隆至表达载体 • 质粒测序 • 大量质粒制备 | 1周 | ||
| 表达评估 | • 转化适合的菌株; • 小量发酵培养; • SDS-PAGE分析,评估蛋白表达情况 | 1周 | • 表达评估结果 | |
| 小量蛋白表达及纯化(1mg) | • 根据表达评估情况进行发酵; • 可溶表达—亲和纯化 • 包涵体表达—变性复性 • SDS-PAGE分析 | 2周 | • 可行性报告 • 如表达纯化可行,根据表达情况,提供一定量的蛋白样品给客户 | |
| 大量表达及纯化(可选) | • 可选择摇瓶或者发酵罐培养 (50-300L) | 根据体积 | • 纯化蛋白 • SDS-PAGE报告 • 实验报告 |
| 服 务 承 诺 |
● 百意欣生物可提供多种大肠杆菌表达菌株,辅以不同的表达条件,确保可溶性表达。
● 结合基因设计及密码子优化、蛋白表达及纯化处理,我公司原核表达的蛋白质纯度在90%以上。
● 提供蛋白质表达服务报告,附测序报告,诱导条件,纯化条件及SDS-PAGE鉴定结果。
| 案 例 展 示 | ||||
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文献和实验高手进行补充 pET,原核表达金标准(转) pET 载体中,目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录 和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen 的 pET 系统不断扩大,提供了用于表达的新技术和选择,目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点 · 是原核蛋白表达 引用最多的系统 · 在任何大肠杆菌 表达系统中,基础
E. coli • 预制蛋白表达载体,专门针对35,000个人类基因所设计 • 合成全长、序列优化且经过验证的cDNA,cDNA免费克隆到表达载体,确保在E.coli体内体外系统高效表达蛋白 • 整套解决方案,提供QIAgenes Expression construct E.coli, Positive Control, Anti-His Antibody和Ni-NTA Spin column表达载体结构 • 含有T7启动子,可直接在BL21(DE3)等菌株或利用无细胞系统进行
最近2个月都在做原核表达,刚开始什么都不会,连SDS-PAGE都跑成模糊的一片,其中的辛酸只有自己知道,现在实验慢慢上正轨了,自己也积累了一些经验。很怀恋之前探索的那段时光,现在把我做蛋白表达的过程和一些问题写出来,希望能够帮助开始做蛋白表达的人少走一些弯路。 1、表达载体的构建构建表达载体是比较简单的,不过也是需要对你的蛋白还有所用的载体有一个详细的认识,对于比较大的蛋白最好选用能够助溶的标签,但是也不是固定的,比如我的蛋白有65-70KD,我也用的也是HIS,上清也是有少量表达。最关键
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