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康朗生物
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50次×50μl体系|200次×50μl体系
RealMasterMix(SYBR Green)
规格:50次×50μl体系|200次×50μl体系RealMasterMix 是一种使用SYBR Green进行Real Time PCR扩增反应的全新预混系统。RealMasterMix 中包含了优化配比的dNTP、增强剂、稳定剂等,以提高产物特异性和反应灵敏度。同时,还加入了ROX 作为内参染料,以使Real Time PCR 中的荧光达到最优状态。
RealMasterMix 采用全新的Hotmaster Taq DNA 聚合酶,该酶不同于一般Hot-start 酶之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而Hotmaster Taq DNA 聚合酶是利用抑制剂通过温度调节方式封闭Hotmaster Taq DNA聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。
产品特点:
试剂盒中使用了改良后的Hotmaster Taq Polymerase,具有高扩增效率,高扩增灵敏度,高扩增特异性的特点。
独特的Mg2+自动调整系统,能够随时保证为PCR提供最佳的Mg2+浓度。
独特配制的SYBR Solution可满足不同类型的荧光定量实验需求。
保存条件:
-20℃避光保存
产品应用:
该试剂盒确保DNA或cDNA模板的准确定量,适用于各种类型荧光定量PCR仪。
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文献和实验SYBR Green Quantitative PCR Protocol
12μl of master mix for each well, plus some excess1 Rxn: 10μl SYBR Green Mix 52 Rxn: 520μl SYBR 0.4μl Forward Primer (10μM stock) 20.8μl F
REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL
1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul2、Primer 浓度,需要摸索,从200nM到700nm等,设置不同浓度。3、每个引物浓度,从well 1到12设置4个样本,阳性cDNA 1和2,NTC以及H2O,做triplicate。4、若用ABI7000或7700,所有的PCR条件可设置成一致的,减少麻烦,当然,引物
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