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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
4次
大提柱式土壤DNA提取试剂盒
规格:4次编号:KL80928
产品简介:
本产品是在本公司柱式土壤DNAOUT(CAT#:71205-50)基础上开发而得的大提升级产品,用于从各种土壤样品和河海沉积物中大量提取高质量的DNA的试剂。跟柱式土壤DNAOUT相比它具有下列特点
1.处理量大,一次最多可以处理20克的土壤样品。
2.去污染效果更好,得到的DNA可以直接作为PCR模板或酶切,不需要再进行去腐殖酸处理。
3.操作过程更加简单快速,整个操作只需要10多分钟,扩容性好。
4.产量高,每克土壤一般可以提取到5-50 μ g DNA,片段长度在20-50 Kb,OD260/280一般都在1.8以上。
5.适合于各种土壤(包括河海沉积物)。
使用及效果:
将3-20克的土壤与10 mL溶液A在自备50 mL塑料离心管中剧烈振荡5-10分钟后,65℃保温5分钟,离心2分钟,将上清液转移到新的自备50 mL塑料离心管中,加入等体积溶液B,混匀后冰浴5分钟,离心2分钟,将上清液转移到新的自备50mL塑料离心管中,加入1.5倍体积的溶液C,混匀后转移到大提离心吸附柱中,离心5分钟,弃穿透液,用10 mL通用洗柱液洗两次,干甩后用0.5-1 mL DNA洗脱液即得DNA。
运输及保存:
常温,有效期一年。
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文献和实验方法。故本采用试剂盒和相关文献的方法作为参考,对垫料总DNA的提取进行摸索。 样品采集自中国人民解放军73121部队福建福州新店养猪场,垫料使用时间3-5个月。分别采用土壤总DNA提取试剂盒法、粪便总DNA提取试剂盒法、淤泥总DNA提取试剂盒法、SDS法、CTAB 法和SDS-CTAB结合法提取养猪发酵床垫料微生物总DNA,对6种方法提取的DNA的浓度和纯度进行比较评价。 采用土壤总DNA提取试剂盒法提取四种垫料的DNA,所得到的DNA浓度最低,质量也很低,并且纯度也很低
,如Buffer PBS等,把微生物从土壤中分离出来,然后再进行DNA的提取。间接法可大大降低土壤中腐殖酸,重金属盐对DNA提取带来的影响,但是这种方法会丢失许多微生物,得到的DNA并非土壤样品中的全基因组(宏基因组),间接法使用的已经很少了。 目前市面上对于去除腐殖质工艺做的最好的试剂盒,就是MPbio公司的土壤DNA提取试剂盒,该试剂盒能够有效去除土壤样本中的腐殖质,极大提高目标DNA的提取浓度,很多土壤相关工作人员都选用该试剂盒。不过优秀的产品也会有短板,MP试剂盒在有效去除腐殖质的过程中难免
物的DNA。多年来,我们对阴性对照进行了测序,只使用了实验室中使用的试剂,没有添加样品模板,同时进行了人体微生物菌群研究,并在测序结果中发现了不同程度的污染环境的细菌。这些包括土壤和水的居民,如Ralstonia,缓生根瘤菌,Herbaspirillum,假单胞菌和伯克霍尔德菌。我们认为它们起源于DNA提取试剂盒或PCR试剂,较早的出版物也证实在其他地方也观察到了这一现象。最近,我们还看到了一些描述来自低生物量环境的细菌的出版物,在这些环境中,与我们以前在阴性对照中观察到的污染物类似的细菌被强调
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