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- 百奥莱博
- 北京
- YT474
- 2026年05月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
N-CFP plasmid（with CMV promoter）
- 库存：
895
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
1μg
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售YT474型N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)大量库存促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：YT474型N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)大量库存促销
编号：YT474
英文名：N-CFP plasmid（with CMV promoter）
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含CFP(Cyan Fluorescent Protein, 青色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个CFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有CFP标签的融合蛋白。利用CFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达量和细胞内定位，也可以利用CFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。CFP与GFP高度相似，可以尝试用GFP抗体检测CFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| CFP | 677-1393 |
| Multiple cloning site | 1394-1483 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
| SV40 polyA signal | 1536-1919 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
| bla promoter | 2388-2512 |
| SV40 promoter | 2532-2870 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
| pUC origin | 4284-4951 |
本质粒(5003bp)的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
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·LC3B抗体
编号：YT816
英文名称：anti-LC3B antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的LC3B氨基端的一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。
本LC3B抗体识别的是总LC3B(total LC3B)，可以检测内源性的LC3B，可以同时识别LC3B-I和LC3B-II，分子量依次分别为16kD和14kD。
自噬(Autophagy)是一种最终通过溶酶体(lysosome)降解部分细胞自身组份的的分解代谢过程。自噬通常会在营养缺乏的情况下被激活，同时又与许多生理病理过程相关，包括生长、分化、神经退行性疾病、感染和肿瘤等。LC3(light chain 3)是目前公认的自噬分子标记物(autophagy marker)。LC3最初发现时被认为是微管关联蛋白1A和1B(microtubule-associated proteins 1A and 1B)，被称为MAP1LC3，随后发现LC3与酵母蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有较高相似性，并在自噬过程中起重要作用。哺乳动物中有三种LC3，包括LC3A、LC3B和LC3C，它们在自噬过程中存在相关的翻译后修饰。LC3蛋白首先会在合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切，产生细胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中，LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为14kD的LC3-II，并定位到自噬小体中。这样，自噬小体中存在的LC3，和低分子量的LC3-II都被当做细胞发生自噬的分子标志(autophagy marker)，并且LC3-II的含量和发生自噬的程度成正比。LC3B作为LC3的一种，同样可以用作自噬的分子标志。
产品组份：
LC3B抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数：
免疫原：人工合成的LC3B氨基端的一段多肽
宿主：兔
用途：WB,IF-IC,FCM
交叉反应性：人，小鼠，大鼠 (猴,鸡,牛,非洲爪蟾)
LC3B分子量：14/16kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF-IC(1:400),FCM(1:50)
注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件：-20℃，有效期一年。
YT474型N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白)大量库存促销关键词：N端CFP标签融合蛋白质粒(青色荧光蛋白),YT474,N-CFP plasmid（with CMV promoter）
·小鼠抗HSP60抗体
编号：YT726
英文名称：HSP60 Mouse Monoclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于小鼠的抗HSP60的单克隆抗体。
宿主： 小鼠
克隆性： 单克隆抗体
用途： WB,IHC,ICC, IF
交叉反应性： 人，小鼠，大鼠
分子量： 61KDa
推荐稀释比例： WB(1:1000),IF(1:100),IHC(1:100),ICC(1:100)
| About this Antibody | |
| Name | HSP60 Mouse Monoclonal Antibody |
| Category | Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody |
| Isotype | IgG1 |
| Purification | ProA affinity purified |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to HSP60. |
| Gene ID | 3329 |
| SwissProt | P10809 |
| Synonyms | CPN60; CHAPERONIN 60-KD; GroEL E. COLI HOMOLOG OF HEAT-SHOCK 60-KD PROTEIN1; heat shock 60kDa protein 1 (chaperonin) |
| Category | Protein Folding and Trafficking |
| Background | The 60 kDa heat shock protein (HSP60) is a highly conserved protein that acts as a chaperone involved in correct folding of newly synthesized proteins. Mainly expressed in mitochondria, HPS60 has also been found in the cytosol of normal heart and muscle cells. The HSP60 proteins are abundant in the cell and are highly conserved between bacteria and human, with 50%-60% sequence homology. Mammalian HSP60 is expressed in the mitochondria at a low level and rapidly up-regulated under stresses, such as heat shock, and on some occasions with changes in intracellular location including expression on the cell surface. |
注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
储存条件：-20℃，有效期一年。
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文献和实验)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组 蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点： 标签的分子 量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能; His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析 去除杂蛋白，使复性不受其它蛋白
两个不发光的片段，分别与待测蛋白A和B融合。 ◆ BiFC系统包含两个质粒，一个质粒上带有到YFP蛋白的N端1-173个氨基酸 （YN173），另一个质粒上保留YFP蛋白C端155-238位（YC155）；此设计可以增强弱互作蛋白的荧光信号。将待测蛋白A和B分别构建到两个载体上。 ◆ 载体上分别带有Myc标签和HA标签，可供WB验证。 ◆将待测蛋白A和B分别构建到两个载体上，与YFP的N部分和C部分分别融合表达，如果A和B蛋白能够结合，则YFP的两个部分也能重新组合在一起发出荧光。 简单说：有荧光
。当某一个标签的使用，一是能构成表位利于纯化和检测；二是构成独特的结构特征（结合配体）利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力，可用于固定化金属螯合层析(IMAC)，对重组蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点：1.标签的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD，一般不影响目标蛋白的功能；2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解
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