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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")pEGFP-N1 哺乳动物表达载体促销,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:pEGFP-N1 哺乳动物表达载体促销
品牌:百奥莱博
规格:20μl
产地:国产|进口
pEGFP-N1编码野生型GFP的一个红移变体,已被优化,有更亮的荧光,在哺乳细胞有更高的表达,(最大激发波长=488nm,最大释放波长=507nm)。
EGFP基因编码序列,含有超过190个沉默碱基的变化,这符合人类密码子使用偏好。
EGFP序列的一侧已经转变成和KozaK一致的翻译起始位点,进一步提高了在真核细胞的翻译效率。
启动子:CMV
复制子:pUC ori,f1 ori
终止子:SV40 ploy(A)
载体别名:pEGFPN1,pEGFP N1
载体分类:哺乳细胞表达载体,荧光蛋白报告载体
载体大小:4733bp
载体标签:增强型荧光蛋白报告基因EGFP
原核抗性:卡那霉素(Kanamycin)
筛选标记:新霉素(Neomycin)
克隆菌株:DH5α
表达宿主:哺乳细胞
培养条件:37℃,LB培养基
5" 测序引物:CMV-F:5"-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3"
3" 测序引物:EGFP-N:5"-CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG-3"
备注:载体的MCS多克隆酶切位点,有EcoR I,BamH I等酶切位点。
储存条件:-20℃
欲咨询购买pEGFP-N1 哺乳动物表达载体促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(FITC显色)
编号:QN1227
英文名称:SABC(Rabbit IgG)-FITC Kit
规格:100T-200T
本试剂盒适合于一抗为兔IgG来源的免疫组化实验,FITC荧光检测。
试剂盒组份:
封闭液(5% BSA)——————————10ml
Bio-羊抗兔IgG浓缩液-———————100ul
SABC-FITC浓缩液-—————————100ul
稀释液——————————————30ml
抗荧光衰减封片剂—————————10ml
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。
操作步骤:(以石蜡切片热修复为例)
1. 切片常规脱蜡至水。
2. 可选步聚:
a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10min后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10min,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步,直接进入下一步。
3. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37℃ 孵育1h左右或20℃ 2h左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2min(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5. 根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2min。
6. 根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液,20-37℃孵育30min(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5min。
7. 滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
对于细胞爬片,固定后,PBS漂洗两次,再用0.5% Trxiton X-100室温孵育20min, PBS漂洗两次,接上述第3步。
对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,再接上述第2步。
注意事项:如果背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01%—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
pEGFP-N1 哺乳动物表达载体促销关键词:pEGFPN1,pEGFP N1,pEGFP-N1 哺乳动物表达载体,百奥莱博
·硝酸纤维素膜(NC膜)(0.45um)
编号:QN1171
英文名称:nitrocellulose filter membrane
规格:30cm*3m
硝酸纤维素膜在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中最重要的耗材之一。
1、结合力强:硝酸纤维素膜是世界上实用最为广泛的特异性转移介质之一,硝酸纤维素膜采用100%纯硝酸纤维素材料制成,确保了最高的结合能力。
2、使用方便:兼容多种检测方法,与PVDF膜相比,不需要甲醇浸泡过程,这样使得那些需要亲水环境下的蛋白质转移。在转移前,仅需要在水中简单润湿,然后置于转移缓冲液中,不需要其他的预湿步骤了。
3、背景低:除了具有高结合力外,硝酸纤维素膜本身产生的背景非常低,膜特有的表面性质保证了优异的信噪比,在膜洗脱时不需要严格的洗脱条件。
4、小分子蛋白的高截留率:硝酸纤维膜有多种孔径以供选择,按照不同的使用要求进行选择相应的孔径的膜,0.22um的硝酸纤维素膜通过小孔径来截留分子量小于20kD的蛋白质分子。0.45um的膜是较大分子蛋白和核酸的理想选择,0.1um 的膜常用于分子量小于7kD的蛋白质。
5、经实验证明,改膜主要优势在于结合在膜上的分子识别活性长达5年。
·脂多糖(LPS)
编号:QN0166
英文名称:Lipopolysaccharides;LPS
规格:10mg|100mg
本品是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种特有成分,位于细胞壁的最外层并暴露于非荚膜细菌的细胞表面,有利于维持细胞外膜的完整性,保护细菌免受胆汁盐和脂类抗生素的破坏。结构上,脂多糖由类脂A、核心多糖和O-多糖侧链组成。其中类脂质A是构成细菌内毒素的主要成分,决定其毒性强弱;而O-多糖侧链在不同细菌间是高度变化的,特异性决定细菌的血清型。
别名:LPS 内毒素 细菌内毒素
储存条件:2~8℃冷藏保存
纯度:≥99%
性状:白色至微褐色絮状冻干粉
LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。将LPS分别与FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反应即可得到FITC、TRITC或TNP标记的LPS,主要用于非胸腺依赖性B细胞对细菌LPS的免疫应答研究。。
LPS可通过TCA、酚、酚-*仿-石油醚等方法制备,其中最后一种方法为粗提取法。TCA和酚提取得到的LPS在结构上、电泳图谱和内毒素水平均较相似,不同之处在于含有的核酸和蛋白质残留量不同,TCA法得到的LPS含有约2%的RNA和10%的变性蛋白。酚法提取的LPS含有达60%的RNA和少于1%的蛋白。用凝胶过滤层析可除去酚提取LPS中的残留蛋白,但是仍会留下约10-20%的核酸。进一步用离子交换层析法纯化可得到<1%蛋白和<1%RNA的LPS。
本品来源于血清型大肠杆菌O55:B55,用*法提取而得。其内毒素水平不少于500,000 EU (endotoxin units)/mg,经分析,1ng相当于5EU(鲎试剂法)和10EU(显色法)。LPS O55:B55可用于刺激人腹腔巨噬细胞(1ng/ml)以及马腹腔巨噬细胞的活动(1-100ng/ml)。
使用方法:
1. LPS储存液的配制,用于细胞培养相关实验:将1mg LPS重悬于1ml无菌平衡盐溶液或细胞培养基,轻轻旋涡振荡直至粉末完全溶解,即得到1mg/ml的储存液。此储存液可进一步用无菌平衡盐或细胞培养基稀释至需要的工作浓度。
2. LPS储存液的保存:本储存液(1mg/ml)可放在4℃保存,约一个月稳定;也可分装成单次用量后放到-20℃,2年稳定。避免反复冻融。
注意事项:
1. LPS溶液应储存于硅烷化容器内,因为LPS可吸附于塑料或某些玻璃器皿,尤其当其浓度<0.1mg/ml时。但当LPS浓度大于1mg/ml时,上述吸附则可忽略不计。
2. 如使用玻璃器皿,则需旋涡振荡LPS溶液至少30min,以重溶被吸附溶质。
pEGFP-N1 哺乳动物表达载体促销关键词:pEGFPN1,pEGFP N1,pEGFP-N1 哺乳动物表达载体,百奥莱博
ARB12975 小鼠多巴胺D1受体(D1R)血清中含量检测 Mouse dopamine d1 receptor,d1r ELISA KIT
*酚绿B Cerium(III) acetate hydrate 19381-50-1
BTN111201 痰液DNAOUT Sputum DNAOUT
ARB13956 猪热休克蛋白20(HSP-20)酶免分析 Porcine heat shock protein 20,hsp-20 ELISA KIT
NF-254 冻干羊抗人APO-B血清
4-乙酰*基酚 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid 103-90-2
精*酸酶(牛肝) Sebacic acid 9000-96-8
DL-异柠檬酸三*盐 Bromophenol blue 1637-73-6
1772-03-8 D-*基半乳糖 D(+)Galactosamine hydrochloride
腺苷 L-(+)-Tartaric acid disodiu*(代"m") salt 58-61-7
BL1416 "Western blotting(山羊IgG)
PY04-035 *啶酮酸(II) 10mg/支×10支 每支添加于225ml胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)培养基中,用于单增李氏菌增菌肉汤(EB)的配制,也可用于李斯特氏菌的培养
ARB12151 大鼠白介素16(IL-16)elisa检测 Rat interleukin 16,IL-16 ELISA KIT
PY01-084 脑浸粉(牛) 250克|1公斤
BTN130425 *基介质 Pheny Medium
肝素* 1-Pentadecanol 9041-08-01
磺胺对甲氧嘧啶 MTT 651-06-9
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N-2-羟基丙磺酸*盐 Salicyl alcohol 89648-37-3
HC0151 切片盒
F040401 乙肝表面抗原 HBSAg
次硝酸铋 Aluminum acetate basic 1304-85-4
ARB12998 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)含量分析 Mouse platelet antibodies igg/m/a,pa-igg/m/a ELISA KIT
我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购pEGFP-N1 哺乳动物表达载体促销。
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文献和实验多克隆位点区 Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-N1. (Unique restriction sites are in color or bold.) The Not I site follows the EGFP stop codon. The Xba I site (*) is methylated in the DNA provided by CLONTECH. If you wish to digest
pEGFP-N1质粒图谱及信息 多克隆位点区 Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-N1. (Unique restriction sites are in color or bold.) The Not I site follows the EGFP stop codon. The Xba I site (*) is methylated in the DNA provided by CLONTECH
maoliping70:pEGFP-N1为载体表达的核蛋白要确证表达于核内的方法为用PI染色,PI只与核酸结合,在488nm激发下发红光,而GFP发绿光,红光与绿光重叠发黄光。还有以下疑问:1.作为对照的pEGFP-N1空载体转染细胞后表达的GFP蛋白为27KD,能自由通过核孔复合体,也就是说GFP在核内也有表达,那会与PI重叠发黄光影响测定吗?2.有提出GFP在细胞固定时,会从细胞漏出,那细胞本身表达的浆蛋白若分子量小,也会漏出吗?还是因为有定位信号而不漏出?3.细胞固定用的70%乙醇是直接
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