平末端载体连接试剂盒(含多克隆位点)(T4连接酶技术)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖平末端载体连接试剂盒(含多克隆位点)(T4连接酶技术)厂家在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：平末端载体连接试剂盒(含多克隆位点)(T4连接酶技术)厂家
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Zero background flat end fast connection kit(with mcs)
编号：ALH339
规格：20次|40次
本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统，可以高效克隆平末端PCR产物和任何具有平末端的DNA*(代"片")段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA*(代"片")段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需5分钟即可获得超过95%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶（如：Pfu polymerase）扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。

试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体t。该载体含有致死的自杀基因（内含多克隆位点），当载体与片段连接成功，自杀基因无法正确表达，包含重组子的细胞可以正常生长；当载体与片段连接不成功，载体自连后自杀基因正确表达，包含自连空载体的细胞无法存活，即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选，极大地加速了克隆筛选进程。

为方便酶切作图和插入片段基因操作，本试剂盒克隆载体的多克隆位点两侧各包含一个BglII识别序列。此外，该载体含有T7启动子，可用于体内或体外转录、插入片段测序等研究。

试剂盒组份(20次)：
平末端载体(40ng/μl)——————————————20μl
900bp Control（40ng/μl）————————————5μl
2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
T4 DNA ligase（5U/μl）—————————————20μl
Forward Sequencing Primer (10μM)————————50μl
Reverse Sequencing Primer (10μM)————————50μl
注：
forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3’
reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’

储存条件：-20℃，有效期6个月。

本品别名：平末端载体连接试剂盒（含多克隆位点）(T4连接酶技术)|平末端克隆试剂盒

平末端载体连接试剂盒(含多克隆位点)(T4连接酶技术)厂家正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
编号：ALH096
英文名称：Agarose gel DNA Recovery Kit
规格：50次|100次|200次
本试剂盒适用于琼脂糖凝胶DNA的纯化回收。在高离序盐存在的情况下，DNA*(代"片")断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(100次)：
平衡液——————————10ml
溶胶液DD—————————50ml×2
漂洗液WB—————————25ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱和收集管(2ml)-———100套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化*(代"钠")和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
5.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 回收纯化的DNA*(代"片")段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA*(代"片")断大小有关。一般1-15μg，100bp-5kb的DNA*(代"片")段，回收率可高达85％。
5. 切胶回收时，紫外灯观察对DNA*(代"片")段有损坏作用，应该尽可能使用能量低的长波紫外线，并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，DNA*(代"片")段应该保存在－20℃。DNA*(代"片")段如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·超纯血液总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
编号：ALH005
英文名称：Ultra Pure Total RNA Extraction Kit From Blood
规格：20次|50次
本试剂盒本试剂盒适用于快速提取全血高纯度总RNA。采用改进的异硫氰酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA 酶， 然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品组分：

组份	20次	50次
10X红细胞裂解液RLB	10ml	25ml
裂解液RL	25ml	50ml
去蛋白液RE	15ml	25ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
70%乙醇	4ml RNase-free H2O	9ml RNase-free H2O
吸附柱	20个	50个
收集管（2ml）	20个	50个

产品特点：
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3. 独特的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4. 多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5. 有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。

注意事项：
1. 第一次使用前请先在漂洗液瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有离心步骤如未加说明，均在室温进行。使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂氯*(代"仿")，用户使用前需要自备氯*(代"仿")。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb
（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时，RNA样品应该溶于TE后检测，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后，加氯*(代"仿")前，样品可在–60℃-70℃ 保存一个月以上。
8. 关于DNA的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留, 在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。
4) 在步骤去蛋白液RE 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 消化处理。

储存条件：室温，有效期12个月。(裂解液RL需4℃避光保存)

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