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SureGuide 目录 CRISPR 文库
• 全外显子组范围的敲除筛选 — 靶向所有已知基因的已验证向导
• 序列经过验证的最高质量 GeCKOv2文库
• 可直接包装的慢病毒质粒文库
• 人和小鼠文库 — 用于全基因组范围筛选的常用模式生物/细胞系
• 充分灵活地开发研究应用
可直接包装的目录质粒文库
安捷伦的目录 CRISPR 向导文库靶向人和小鼠基因组中的所有外显子序列,是进行全基因组功能性筛选的理想工具。这些文库包含的内容由知名研究机构所研发,并获得其许可。与其他GeCKO 文库相比,安捷伦的 GeCKO 文库缺失的向导更少,整个文库的均一性更好。小鼠和人 GeCKO 文库均为带有嘌呤霉素选择标记和 GFP 报告基因的质粒,可用于生成高滴度慢病毒颗粒。
订货信息:
| SureGuide GeCKOv2 CRISPR 文库 | |
| 部件号 | G7553A — 人 G7554A — 小鼠 |
| 文库形式 | 可直接包装的质粒文库 |
| 表达载体 | 慢病毒 |
| 向导数量 | 人类 — 123411;小鼠 — 130209 |
| 用户提供 | 慢病毒包装、表达筛选 |
| 已验证序列 | 是 |
| 数量 | 200 ug 质粒 DNA,分为文库 A 和 B |
| 同时包括 | 感受态细胞 |
| 可加入的定制设计 | 无 |
| 对照 | Mal1-C |
www.agilent.com/genomics/CRISPR
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文献和实验病毒包装。SAM 筛选所需的 dCas9-VP64 与 MS2-P65-HSF1 稳转株构建,同样依赖可靠的慢病毒递送,表达水平直接决定激活效果。 CRISPR-Pool文库产品 CRISPR-Pool SAM 文库:全基因组激活筛选文库,采用带 MS2 发夹的专用 gRNA 骨架,靶向各基因 TSS 上游区域。成品文库保证了 gRNA 骨架正确、靶区域设计合理、以及分布均一。 CRISPR-Pool KOUT 文库:敲除筛选文库。两类文库联合使用是最佳策略——敲除找到必需基因,激活找到能逆转表型的基因
CRlSPR/Cas9是细菌和古生物菌用来抵抗外来质粒或噬菌体等遗传物质入侵的一种获得性免疫系统。利用CRlSPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库,通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析,发掘与筛选表型相关的基因,称为CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选。gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具,gRNA文库的建立将在功能基因筛选、疾病机制研究及药物研发等方面发挥重要的功能。 CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选流程
文库筛选是 CRISPR 技术里投入最大、返工代价最高的一类实验。一个筛选项目动辄十几周、消耗大量细胞和测序资源,如果前期条件没备好,中途失败的成本极高。 先说结论:开展文库筛选前必须落实五类条件——合适的宿主细胞(能稳定表达 Cas9、能被低 MOI 高效感染、增殖能力足够)、明确的筛选压力或分选读数、充足的细胞数量(覆盖文库所需的 200–1000 倍)、可靠的病毒滴度与 MOI 实测数据、以及配套的测序与生信分析能力。这五项里任何一项缺失,都不建议启动。 --- 一、细胞条件:能不能
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资料下载:
5991-7347CHCN CRISPR GeCKOv2 library.pdf 附 (下载 14 次)
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