重组 蛋白 L, His 标签

如何提高 HIS 标签蛋白纯化效果

HIS 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的 HIS 标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面：    1、HIS 标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一  超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。   原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螫合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲

【共享】绝对好文：新型蛋白标签概述 『连载』

蛋白标签（protein tag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。随着技术的不断发展，研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。 一、 新型蛋白标签 蛋白标签应用极为广泛，但仍有两个问题不容忽视：（1）蛋白标签以DNA形式编码，它需要转录并翻译成蛋白后才能发挥作用，而这种作用方式本身就是一种缺陷。例如，常用的荧光蛋白标签，在显微镜下观察时，其显像不如人工合成的荧光基团好，但是这种人工合成的荧

[资源][原创] 蛋白标签纯化技术——CBP（钙调蛋白结合肽）

如Western blotte。CBP标签层析纯化解决方案 钙调蛋白—6组氨酸—镍离子熬合介质 CBP钙调蛋白结合肽可特异性的与钙调蛋白结合，我们构建一种在N末端含有6个组氨酸标签的重组钙调蛋白，这种6个组氨酸融合钙调蛋白可与镍离子鏊合柱特意性结合，从而形成了一种能够特意性纯化CBP标签的亲合层析体系。钙调蛋白—琼脂糖介质直接与琼脂糖结合的钙调蛋白分离介质，保存于0.5 M NaCl containing 0.02% thimerosal中，1mg/ml，4% beaded agarose，2-8°C。