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- TA克隆技术（TA cloning）利用Taq聚合酶具有末端转移酶（TdT）活性，但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点，可在PCR产物的3'端加上一个非模板依赖碱基“A”。T载体是一种高效克隆PCR产物的专用载体，因其3'端带有一个突出的“T”尾，能高效地与带“A”尾的PCR产物连接，极大地提高了克隆的效率。TA克隆是目前克隆PCR产物最简便、快捷的方法。
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
TA克隆
- 提供商：
OmegaGenetics
- 规格：
M0014,：TA克隆：目的片段< 1000bp
TA克隆技术（TA cloning）利用Taq聚合酶具有末端转移酶（TdT）活性，但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点，可在PCR产物的3'端加上一个非模板依赖碱基“A”。T载体是一种高效克隆PCR产物的专用载体，因其3'端带有一个突出的“T”尾，能高效地与带“A”尾的PCR产物连接，极大地提高了克隆的效率。TA克隆是目前克隆PCR产物最简便、快捷的方法。
二、服务内容
将客户的目的片段连接到T载体中
三、服务说明
1. 请提供克隆片段的相关信息，包括名称、大小、样品是否带有“A”尾以及PCR产物是否已纯化。已纯化的PCR产物请确保使用的溶剂为灭菌的双蒸水。
2. PCR已纯化样品：浓度≥20ng/µl,体积≥20µl；PCR未纯化样品：浓度≥50ng/µl, 体积≥25µl。所需DNA的总量会随片段大小的不同而有所变化。样品定量检测结果以我们为准。
3. 请务必在订单上注明 PCR所用引物序列，以便用于克隆结果的核对分析。
4. 若序列中包含高GC、Poly等特殊或复杂结构导致测序中断，我们即视实验成功，将收取全额的实验费用。
四、交付内容
1.
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五、服务价格、周期
| Cat No. | 项目内容 | 价格 | 周期 | 备注 |
| M0014 | TA克隆：目的片段< 1000bp | 200 | 1-2周 | 量大可优惠；需要多个阳性克隆测序等另算 |
| M0015 | TA克隆：目的片段1000bp-2000bp） | 250 | 1-2周 | |
| M0016 | TA克隆：目的片段>2000bp） | 询价 | 1-2周 |
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文献和实验PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接) 【实验目的】 1.掌握DNA回收和连接的基本原理。 2.学习和掌握PCR产物的T-vector克隆。 【实验
快速TA克隆的突破T载体是TA克隆载体的简称，就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。目前市场上常见的T载体，根据连接方法可以分成两种：方法1、以T4连接酶进行连接的方法，这种方法的载体有promega、takara；可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的水平，转化子比较多，阳性率也不错，唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高，要达到较好的连接效率，一般要过夜连接。国内很多公司模仿这种方法制作T载体，不仅连接时间也很长，而且做不到
现象可能原因解决方案 转化后无菌落生长 感受态细胞已经失效用pUC18质粒进行转化，确认细胞的感受态效率。1ng pUC18质粒至少应得到1000个以上的转化子。如有问题，重新制备感受态细胞。 平板所用抗性不对pBS-T载体为amp抗性，工作浓度 100 ug/ml 连接中使用了不恰当的vector:insert 比例估计PCR产物的量，将vector:insert比例限制在3:1到 1:5的范围内。对于极小的PCR产物进行克隆，很可能因为PCR产物严重过量，导致无菌落或菌落极少。 白色
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