- ￥20000 - 30000
- 苏州
- 泓迅科技利用独创的“GPS”（Genotype，Phenotype，Synotype）平台，提供基于CRISPR sgRNA文库的一站式基因功能筛选服务。
- 2026年04月23日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
CRISPR-Cas9 sgRNA文库合成
- 提供商：
泓迅科技
CRISPR sgRNA文库合成技术路线图
CRISPR基因编辑平台一体化服务流程
泓迅CRISPR sgRNA文库构建服务优势
- 丰富的全基因组sgRNA设计经验，覆盖几十种模式物种，亦可针对客户需求的模式物种进行sgRNA设计。
- 根据客户自身需求选择sgRNA表达载体，并提供转染级质粒。
- 行业内领先的QC指标。
- 提供从sgRNA设计、文库构建到慢病毒包装的一站式服务。
CRISPR sgRNA文库合成和构建服务
| 服务项目 | 服务详情 | 周期 |
|---|---|---|
| sgRNA设计 | 针对特定基因分类进行gRNA序列设计 每个基因设计3-6条sgRNA |
1-2周 |
| 芯片合成 | 将所设计的所有sgRNA及阴性对照合成在一张芯片上 | 3-4周 |
| sgRNA文库构建 | 将sgRNA构建到客户的目标载体上 | 2-3周 |
| 文库质粒大抽 | 根据发货量进行转染级质粒抽提 | 1周 |
| 文库质检及NGS验证(可选) |
|
2-3周 |
| 病毒包装(可选) | 慢病毒包装，病毒滴度: 108TU/ml | 2-3周 |
| 总计 | 11-16周 |
CRISPR sgRNA文库构建与筛选应用实例
Genome-Scale CRISPR-Cas9 Knockout Screening in Human Cells Ophir Shalem et al. Science 343, 84 (2014)
1. 明确该药物功能及其致死工作浓度。
2. 构建 CRISPR-Cas9 gRNA慢病毒文库并侵染细胞，构建整合CRISPR-Cas9 gRNA的细胞混合克隆。
3. 筛选：高浓度药物短期内持续作用细胞混合克隆，成活的细胞即为产生耐药性的细胞，其耐药性的产生原因是 CRISPR-Cas9 gRNA导致的基因改变。
4. 存活的细胞通过二代测序，比对得到gRNA 信息，从而推断出起作用的基因靶点。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验vero（非洲绿猴肾cell):贴壁细胞，以25ml小方瓶为例，培养液用的是MEM。 MEM的配制：10%小牛血清，1%双抗，3%谷氨酰胺，1~1.5%NaHCO3. 传代方法： 1、倒掉培养液，如果细胞脏的话可用PBS洗两次，否则不用。 2.、胰酶0.25%2ml消化1~3分钟，容易消化. 3、倒掉胰酶，加MEM9~12ml,将贴壁细胞摇至悬浮，并用吸管吹匀，一传三或一传四。 4、置37度，5%CO2孵箱。
CRlSPR/Cas9是细菌和古生物菌用来抵抗外来质粒或噬菌体等遗传物质入侵的一种获得性免疫系统。利用CRlSPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库，通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析，发掘与筛选表型相关的基因，称为CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选。gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具，gRNA文库的建立将在功能基因筛选、疾病机制研究及药物研发等方面发挥重要的功能。 CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选流程
传代步骤比较传统：倒掉培养液－>PBS洗2遍－>胰酶0.25%消化－>倒掉胰酶－>加培养基－>用吸管吹打均匀－>分瓶－>放置37度，5%CO2孵箱。我的体会是：1、消化时间和实验环境温度也有很大关系，我们实验室条件比较差，不能维持恒温（不过我想大部分实验室目前也还是做不到的）。夏天的时候，消化特别快。但是到了冬天，就很慢，要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以，经验很重要，如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断，首先效率太低，而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶，当感觉到有些泛白，瓶角有少许细胞
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
