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文献和实验单链结合蛋白 single strand binding protein
这种蛋白又称为双螺旋稳定蛋白(helix destabilizing protein)。当解旋酶将双链打开以后,单链DNA具有一种潜在的恢复原来双链的能力,重新形成氢键。而且单链本身若有反向重复也会形成发夹结构,这两种情况都会影响复制的,但SSB可以解决这一问题。SSB并不是酶,是由177个aa组成的蛋白,E.coli 的SSB以四聚存在,分子量为74KDa,结合在单链上,每个分子可以覆盖32Nt,使DNA受到保护,不被酶水解,也不回复成双链,因此可以降低DNA的Tm值。SSB
单链DNA结合蛋白质 single stranded DNAbinding protein
为DNA蛋白质之一种,是与单链 DNA有强的亲和性,与 DNA复制、遗传的重组等 DNA代谢有关的蛋白质。也称螺旋不稳定蛋白质( helix destabili- zing protein),又称解 DNA旋卷蛋白质( DNAuntwisting protein)。此蛋白质与单链 DNA协同( cooperative)结合,其结合与 DNA碱基的排列是非特异性的。此蛋白质结合的 DNA使 DNA多聚酶的活性增高,并促进重组过程。单链 DNA结合蛋白质在生物界广泛存在, B.
全,核酸释放不完全,就不会产生扩增。常见的简单处理:煮沸,优点:省时,操作简单。缺点:煮沸释放的 DNA 有时不能完全与结构蛋白或 DNA 结合蛋白分离,从而出现扩增抑制作用。单独煮沸的方法会降低扩增敏感性。 2. 热稳定 DNA 聚合酶失活 腐殖化合物是环境样本中最常见的抑制物,其可能是通过对 Mg2+的螯合作用而抑制聚合酶活性。 3. 降解或包裹核酸 DNA 可因为一些物理、化学或酶等因素作用而出现降解,如贮存的扩增产物在扩增后电泳时,有时出现的条带模糊,就是因为 DNA 的降解所致
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