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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
421
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100T/500T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括质粒DAN提取试剂盒现货促销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:质粒DAN提取试剂盒现货促销
编号:XH013
规格:100T/500T
原理简介
本试剂盒是在经典的质粒提取方法上改进而来,利用玻璃奶吸附质粒,代替有毒的酚氯*(代"仿")抽提,得到的DNA可用于常规下游应用实验,但可能并不适用于转染(转染请选去内毒素质量提取试剂盒。本试剂盒(以100T为例)可以用100小次或者5大次提取。
注意事项
1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2.溶液Ⅰ中加入RNaseA后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。
3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。
1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。
2.在收集的菌液中,加入150ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3.每管加入150ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4.放置2-3分钟后,每管加入150ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。
5.最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。
7.玻璃奶摇匀。
8.在第6步的上清中加入50ul混匀的玻璃奶,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。
9.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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·Taq DNA Polymerase
编号:XH024
规格:1000U/5000U
产品简介:
我们生产的Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermus aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为94 KD。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和5’→3’核酸外切酶活性,无3’→5’核酸外切酶活性。在PCR反应中,该酶的延伸速度为1-2kb/分钟,PCR产物3’端带A,可直接用于T/A载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组DNA污染,稳定性好,特异性强,一般用于小于3kb的对保真度要求不高的DNA*(代"片")段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等。
活性定义:
1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
保存
-20℃
2-8℃
产品成分:
酶储存缓冲液
10×Taq Buffer(含Mg2+)
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)
200 mM Tris-HCl (pH 8.8)
0.1 mM EDTA
200 mM KCl
1 mM DTT
20 mM MgCl2
100 mM KCl
1%Triton X-100
50% glycerol
其它
Stabilizers
注意事项:
1、Taq DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。
2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
·PUC19
编号:XH030
规格:5ug(0.1 OD)
浓度
250~1,000μg/ml
贮存溶液
Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
EDTA 1mM
产品说明
pUC19载体适合于DNA*(代"片")段的克隆、进行DNA测序、对外源基因进行表达等。由于在lacZ领域中含有多克隆位点,因此在以lacZ缺欠细胞作为宿主 (如:JM109等) 进行转化后,在含有IPTG、X-Gal 的平板培养基上进行培养时,可以很容易地通过兰白筛选,判断载体中有无DNA*(代"片")段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因,对插入载体中的DNA*(代"片")段进行测序等。进行DNA测序时,可以方便地使用M13系列的通用引物。
■ 链长
2,686 bp
■ 用途
1. DNA*(代"片")段的克隆。
2. 利用lac promoter进行基因表达。
3. 使用M13系列引物进行DNA测序。
我公司生产供应销售的DNA纯化正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购质粒DAN提取试剂盒现货促销。
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文献和实验问:我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢答:您的情况我们去年也曾遇到过。目前市面上的质粒提取试剂盒林林总总,令人难以取舍。我觉得首先应该根据自己的需要来选取。进口的试剂盒,比如qiagene,omiga,promega等固然好,但是价格较贵,如果自己的实验要求不是很高的话,用这些试剂盒感觉有浪费的嫌疑(当然经费充足无可厚非)。但是有些国产的试剂盒不怎么令然放心,象楼主这样做稳定转染的,要花费很多
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【原创】OMEGA质粒提取试剂盒说明书: 给刚进实验室,又需要做质粒提取的XDJM
自己的实验刚刚开始,又涉及到质粒的提取。翻译了OMEGA 的大/小规模质粒提取试剂盒的说明书(D6922-01和D6942-01)。希望能给和我一样的新手一点帮助,同时请大家指正多给建议,特别是自己的心得啊。全是自己打的,帮顶让大家都能下啊:)E.Z.N.A Plasmid Miniprep Protocol 质粒小规模提取试剂盒Product Number D6942 and D6943,D6944注意:1. 使用之前,把试剂盒中的一小管RNA酶加入溶液Ⅰ. 4℃保存2. 加60ml
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