北京现货质粒DAN提取试剂盒库存

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京现货质粒DAN提取试剂盒库存由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多质粒DAN提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：北京现货质粒DAN提取试剂盒库存
规格：100T/500T
产地：国产|进口
编号：XH013
品牌：百奥莱博
原理简介
本试剂盒是在经典的质粒提取方法上改进而来，利用玻璃奶吸附质粒，代替有毒的酚*仿抽提，得到的DNA可用于常规下游应用实验，但可能并不适用于转染(转染请选去内毒素质量提取试剂盒。本试剂盒（以100T为例）可以用100小次或者5大次提取。
注意事项
1．溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀，可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2．溶液Ⅰ中加入RNaseA后请放2－8度保存，如果长久不用（如一个月），可-20度冻存，或者按照比较分次加入。
3．可根据实验情况中量或者大量提取，加入的试剂等比放大。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA，混匀，2－8度保存。
1．取过夜菌1-5毫升，5000g离心1分钟收集细菌沉淀，弃上清（可重复多次收集于一管中，收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数），如为阳性细菌，可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液，37度处理30分钟，离心，收集沉淀。
2．在收集的菌液中，加入150ul溶液I，重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开，无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3．每管加入150ul溶液Ⅱ（如有沉淀，可37度水浴），轻轻颠倒离心管4-6次，使细菌完全裂解，溶液透明。放置2-3分钟，不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4．放置2-3分钟后，每管加入150ul溶液III，随即颠倒离心管4-6次混匀，可见白色絮状物产生。
5．最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6．将上清转移到新的离心管中，如有沉淀，可再次离心。
7．玻璃奶摇匀。
8．在第6步的上清中加入50ul混匀的玻璃奶，混匀。室温放置5分钟，期间颠倒2次。
9．10000转/分钟离心1分钟，倒掉上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟（如果为大提，请延长放置时间到30分钟，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入50－100ulTE缓冲液混匀溶解，55℃水浴5分钟。离心，取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
8．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。

更多有关北京现货质粒DAN提取试剂盒库存的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·羊抗兔IgG（纯化抗体）
编号：XH094
规格：1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白兔IgG，用此兔IgG免疫山羊，经过多次免疫后，测得山羊血清的效价达到要求后，动脉一次取血，静置得到血清，血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白，再用硫*(代"酸")铵沉淀，透析，定量等进一步处理得到纯化羊抗兔IgG抗体，此纯化抗体可以用于标记，免疫沉淀，ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高，本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体，以兔IgG结合在树脂上，吸附全部有活性的抗体，这样得到的抗体纯度更高，当然，成本也更高。

·聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒
编号：XH052
规格：20T/50T
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，从聚丙*(代"烯")酰胺凝胶上回收DNA片段，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛
选、连接和转化等实验。配以特制的研磨杵和过滤柱，使你的操作更方便。
操作步骤：(所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心)
第一次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇。
1、将单一的目的DNA条带从聚丙*(代"烯")酰胺凝胶中切下（尽量切除多余部分），放入1.5ml离心管中，称取重量，用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶胶液吹打混匀（每100mg胶加入200ul溶胶液），75℃水浴30分钟。
2、用1ml的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中（将胶一起吸入，溶液过多时可分次加入）。13,000rpm离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管。
3、取六倍体积结合液加入原离心管（每100mg胶加入600ul），清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入)，颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀，13,000rpm离心1分钟。将两次收集的滤出液混合。
4、将总滤出液混匀后加入吸附柱中（溶液过多时可分次加入），13,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。
5、向吸附柱中加入600μl漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），13,000rpm离心30-60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
6、向吸附柱中加入600μl漂洗液，13,000rpm离心30-60秒，倒掉废液。
7、将离心吸附柱放回收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂
洗液。将吸附柱开盖置于室温3-5分钟，彻底晾干，以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8、将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量65–70℃预热的洗脱缓冲液（20-30μl），室温放置2分钟。13,000rpm离心2分钟收集DNA溶液。
注意：①为了增加回收效率，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，13,000rpm再次离心1分钟。
②洗脱缓冲液体积不应少于20μl，体积过小影响回收效率。
③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
9、DNA回收产物直接下一步实验或者-20℃保存。
注意事项：
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
2、切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。
3、本试剂盒对<50bpDNA片段回收效率偏低（30%左右），如想回
收，应加大结合液的体积，延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越
小，回收率越低。


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·pUC18
编号：XH029
规格：5ug(0.1 OD)
浓度
250～1,000μg/ml
贮存溶液
Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
EDTA 1mM

产品说明
pUC18载体适合于DNA片段的克隆、进行DNA测序、对外源基因进行表达等。由于在lacZ领域中含有多克隆位点，因此在以lacZ缺欠细胞作为宿主 (如：JM109等) 进行转化后，在含有IPTG、X-Gal 的平板培养基上进行培养时，可以很容易地通过兰白筛选，判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因，对插入载体中的DNA片段进行测序等。进行DNA测序时，可以方便地使用M13系列的通用引物。
■ 链长
2,686 bp
■ 用途
1. DNA片段的克隆。
2. 利用lac promoter进行基因表达。
3. 使用M13系列引物进行DNA测序。


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