做稳定转染如何选择质粒提取试剂盒

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总有一种转染方法适合你

问：我想用质脂体转染 法将质粒稳定转染入肿瘤细胞，请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用，所以想选一种即好用又较为便宜的，请求指点。谢谢

答：您的情况我们去年也曾遇到过。目前市面上的质粒提取试剂盒林林总总，令人难以取舍。我觉得首先应该根据自己的需要来选取。进口的试剂盒，比如qiagene，omiga，promega等固然好，但是价格较贵，如果自己的实验要求不是很高的话，用这些试剂盒感觉有浪费的嫌疑(当然经费充足无可厚非)。但是有些国产的试剂盒不怎么令然放心，象楼主这样做稳定转染 的，要花费很多的时间和精力，最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失，而且脂质体都比较贵。因此，性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别：

1.高级转染 级：这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化，主要使用于基因治疗，cell显微注射，原代细胞转染等。

2.常规转染 级：它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。

3.分子 生物学级，相当于1次cscl超速离心纯化的质粒。

4.测序级：主要用于常规酶切与连接用。

我们实验室用过qiagene，axgene，omiga和国产天根的。大家对qiagene的评价最好。但是我自己的经验(qiagene的漂洗液用完了)是用qiagene的吸附柱和天根的漂洗液联合得到的质粒最满意od26/od280为1.8(呵呵，只是个别案例，样本含量不足，仅供参考)。我只做过原代细胞的顺时转染，稳定转染我没有做过，建议楼主可以考虑大家评价较好(比如天根的)试试看。记得有些公司经常做活动给一些试用装，也可以尝试。楼主也可以结合其他战友的建议。