牛血清白蛋白封堵液

免疫印迹实验相关原理介绍

（pH6.8） 1.5 mol/L Tris•HCl（pH8.8） 10% SDS 10% 过硫酸胺（APS） 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶（分离胶）浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织

模拟过氧化物酶的制备、固定与应用

一．实验目的 学习一种人工合成模拟过氧化物酶的方法，了解柱子型固定酶的原理以及感性认识酶分析法的一些应用。 二．实验原理 过氧化物酶的辅基是血红素。在体外将血红素与牛血清白蛋白结合制备成含血红素的蛋白质分子作为模拟过氧化物酶。在确定血红素与牛血清白蛋白结合后，检测其的过氧化物酶活性。然后将此人工模拟酶固定在载体琼脂糖凝胶（Sepharose 4B）上并装柱，应用于检测样品中痕量过氧化氢的含量，因为过氧化氢的测定

垂直电泳槽的使用

•如只运行一块凝胶，则需要把胶门（很厚的玻璃板）插入到电极空着的一边。将SDS-PAGE电泳缓冲液倒入凝胶三明治夹与胶门之间，直到缓冲液表面距离玻璃板上缘1cm（图 11）。检查是否有渗漏。将1升的SDS-PAGE电泳缓冲液倒入槽内凝胶组件的周围。 样品制备和装载： •将试管插入至制冷恒温金属浴（4℃），以解冻冷冻牛血清白蛋白（BSA）（1 mg/ml）样品。 然后，加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。 •把样品加样到凝胶中前, 请在恒温金属浴中以