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信裕生物
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50 mL
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文献和实验相关专题 本文主要介绍了利用Southern印迹杂交技术来获得DNA分子中基因编码区的大小和位置的实验原理、方法步骤。主要分成待测核酸样品的制备和 琼脂 糖凝胶电泳分离待测DNA样品两部分。 Southern印迹杂交仪器 实验原理 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成
大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式,即探针为液相,被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液(杂交液)中并需要一定的温度,可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买,不同的杂交液配方相差较大,杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方:PEG 6000 10%;SDS 0.5%;6×SSC;50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1.预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min,在杂交瓶中加入杂交
miRNA Northern Blot实验步骤 1975年,英国科学家埃德温·迈勒·萨瑟恩(Edwin Mellor Southern)创建了Southern Blot技术用于检测DNA。基于同样的原理,1977年由斯坦福大学的James Alwine、David Kemp和George Stark开发出了用于检测RNA的Northern Blot技术,至今仍然是一种经典的RNA检测技术。 miRNA在不同组织中丰度变化大,例如,miR-133在骨骼肌中表达很高,在心肌中
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