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2年
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pET28a-T4 lysozyme
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100
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kelei-bio
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20μl
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文献和实验一种低分子量（ 14700道尔顿）的、不耐热的碱性蛋白质，其中富含精氨酸。人体内许多组织及体液中都含有溶菌酶，以乳汁、唾液、肠道以及吞噬细胞溶酶体颗粒中含量较多，组织中含量较少。正常的尿液、汗液及脑脊液中不含溶菌酶。溶菌酶能直接水解革兰氏阳性菌细胞壁中乙酰葡糖胺与乙酰胞壁酸分子间的连接，使细胞壁破坏，水分进入，细胞崩解。而革兰氏阴性菌细胞壁粘肽层外有一层脂多糖和脂蛋白，故不受溶菌酶的影响。在抗体存在下，脂多糖及脂蛋白受到破坏时，溶菌酶才能发挥作用；在有抗体、补体、溶菌
亦称胞壁质酶。 EC． 3． 2． 1． 17．作用于细菌细胞壁的胞壁质，水解 N-乙酰胞壁酸与 N-乙酞葡糖胺之间的β -1， 4-胞壁酰胺键。因此当它作用于活菌时，由细胞壁造成的抗渗透压作用就会丧失，从而产生溶菌现象。另外，对反应产物寡糖的测定，可为细胞壁化学结构的研究提供重要手段。广泛存在于动物的各种组织、分泌液以及卵白中。从一些植物（甘蓝，芜菁等）中也发现有该酶存在。卵白中含量多且易于结晶提纯，因此对卵白溶菌酶进行了广泛的研究。该酶对硝基苯 -N， N′ -二乙酰二糖苷那种合成二
系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
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