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负20度
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2年
- 英文名：
mEos3.2-Clathrin-15
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
详细请登录网站查询 www.kelei-biology.com.或发邮件至1722105945@qq.com，（QQ:1722105945）我们会第一时间给您回复。
柯雷生物拥有数万种质粒，菌种，基因，细胞株，试剂盒等科研资源，还提供基因合成，质粒改造，载体构建和蛋白表达等精品实验服务
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文献和实验.Na2,（pH8.0）2. 细菌裂解液: 0.2 mol/L NaOH，1% SDS3. 中和液: 60 mL 5M 醋酸钾，11.5 mL 冰醋酸，28.5 mL 双蒸水4. 3 mol/L NaAc (pH 5.2)5. TE 饱和酚 (pH8.0)6. 氯仿/异戊醇 = 24:17. RNase（20 mg/mL）【实验方法与步骤】（一）质粒的小量制备:1. 将 5 mL LB 培养液 (含筛选抗生素) 加入到容量为 15 mL 并通气良好的试管中，然后将转化菌的一个单菌落接种于培养
的PCRMIX，是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一，不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物，GC 含量高达 75% 的模板，都能轻松扩增，不需要费力的“摸条件”！ 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液，浓度为 2x。DNA 扩增时，只需加入模板，引物和水，使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间，避免因多步操作带来的污染，特别适宜高通量筛选基因的扩增
15kb 的大型质粒要注意采用温和的方法（溶菌酶法），剧烈的方法容易使它收到破坏。而小于 15kb 小型质粒则可采取相对剧烈的方法（碱裂解法或煮沸法）。由于我们平时 大多质粒都小于 15kb，所以今天主要讲最常用的碱裂解法小提质粒。1. 将培养过夜的大肠杆菌培养液倒入 1.5 ml 小离心管中，在小离心机中 12 000 rpm，4 ℃ 离心 30 s。2. 尽可能倒干培养液上清。3. 将细菌沉淀，所得重悬于 100 μl 用冰预冷的溶液 I 中，剧烈振荡。溶液 I50 mmol/L 葡萄糖25
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