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- 2025年10月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 英文名：
pLKO.1-TRC-SP6
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
启动子: hPGK,U6，T7
复制子: SV40 Ori，F1 Ori
终止子: SV40 poly(A) signal,bGH poly(A) signal
质粒分类: 病毒系列，慢病毒干扰载体
质粒标签: Stuffer
原核抗性: Amp 筛选标记: Puro
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37℃，有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导，瞬时表达
5'测序引物: U6:ATGGACTATCATATGCTTACCGTA
3'测序引物: Sv40-polyA-R：GAAATTTGTGATGCTATTGC
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文献和实验（只有上游T7无下游SP6）：T7+目的基因-R pEGFP（MCS两侧无通用序列）：自己设计靠近两侧的特异性引物（也可以求助 于测序公司，如：上海英骏/Invitrogen，他们有绝大多数载体的测序用的引物序列） 仔细的阅读你的载体图，选择针对阳性重组子的特异性引物组合 2. 菌落的处理 （我用的是质粒小提，用15ml离心管摇菌，通常加5ml培养基） 挑取新鲜菌落于含抗性的（LB）培养基中 37°C 200rpm摇床 摇2-4小时
一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector（OpenBiosystems） 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因（pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2）和包被质粒（pMD2.G）（Addgene） 3. 脂质体2000（Invitrogen） 4.OptiMEM无血清培养基（Invitrogen） 5. 293T包装细胞（ATCC）
关键词： 副溶血性弧菌 直接溶血毒素基因原核表达载体 构建 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种能引起食物中毒和旅游者腹泻的嗜盐性细菌。直接溶血毒素(thermostable direct hemolysin,TDH)是其主要的致病因子。本研究通过构建tdh基因原核表达载体，并实现表达，以获得与天然抗原结构接近的重组抗原。 构建重组质粒tdh/Trc99A经酶切及PCR
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