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- 2025年10月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 英文名：
pMBP-C
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
启动子: Tac/lac
复制子: ColE1 ori
终止子: rrnB T1 terminator
质粒分类: 大肠杆菌载体；PET系列表达质粒
质粒大小: 6666bp
质粒标签: N-MBP，N-Thrombin，C-6×His
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
表达宿主: BL21(DE3)
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: M13/PUC 5 CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC 3
质粒简介
pMBP-C 表达载体采用 E.coli tac 启动子和胞内可溶性麦芽糖结合蛋白（maltose binding protein），同时选用凝血酶切割位点并在 C端添加6 个His便于采用 chelating sepharose 亲和层析纯化目标蛋白。该表达系统在 Medline 里有大量背景文献参考。它通过 MBP胞内融合表达，表达产物可占菌体的 20%-30%，可形成可溶性蛋白，也可形成包涵体。融合蛋白还可以通过 Amylose 亲和层析纯化。
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文献和实验-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
一.九种表达载体 Pllp-OmpA,pllp-STII,pMBP-P,pMBP-C, pET-GST,pET-Trx,pET-His,pET-CKS,pET-DsbA 二.克隆载体 pTZ19RDNA pUC57DNA PMD18T PQE30 pUC18 pUC
一般情况下，瞬时转染是将 DNA 导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组 DNA 导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的 DNA 不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内（最多一周左右）收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。如果过表达基因用质粒，如果敲降用的是 siRNA（在 microRNA 实验中，过表达用的是 mimics，敲降用的是 inhibitor）。通过瞬时转染，将目的基因敲降或者过表达（gain and loss 实验），观察下游
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